蛋白分析FAQ汇总
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气相色谱法(Gas Chromatography,GC)是一种常用的分析方法,它可以根据样品中不同成分的保留时间和峰面积来分析样品的质量浓度。具体操作步骤如下:1.建立标准曲线:首先,需要测定不同浓度的标准溶液的气相色谱图谱,分别记录各组分的保留时间(Retention Time, tR)和
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微管蛋白(Microtubule proteins)是细胞骨架的主要组成部分,包括α-和β-微管蛋白亚基。纯化微管蛋白涉及多个步骤,以下是一种常用的纯化方法:1.细胞收集:首先,选择适合的细胞系,并将细胞收集在离心管中。通过离心将细胞沉淀下来,去除培养基。2.细胞破碎:将细胞悬浮在微管稳定缓
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• 做蛋白质测序时,切下来的SDS蛋白条带含有不止一条蛋白条带怎么办?
当切下来的SDS蛋白条带含有不止一条蛋白条带时,这些条带可能代表着多个蛋白质或不同的蛋白质异构体(例如不同的翻译产物或翻译后修饰形式)。在这种情况下,需要进一步分离和纯化这些蛋白质,以便单独鉴定每个蛋白质的氨基酸序列。通常,可以使用以下方法来处理含有多个蛋白条带的SDS胶:1.SDS-PAG
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• 一个蛋白一个化学药物小分子可以采用GST PULL down吗?
GST Pull-Down 实验主要用来鉴定蛋白-蛋白间的相互作用。这种方法的原理是通过转基因方式将目标蛋白质与谷胱甘肽 S-转移酶(Glutathione S-transferase, GST)基因融合,利用GST蛋白与谷胱甘肽(Glutathione)的高亲和性,将GST融合蛋白与小鼠抗
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蛋白的肽链测序是指确定蛋白质中氨基酸序列的过程。它是通过将蛋白质分解为小片段(肽段),然后对这些肽段进行测序来实现的。目前常用的方法是质谱法和DNA/RNA测序方法。1.质谱法测序:A.制备样品:将蛋白质进行消化,通常使用酶(如胰蛋白酶)将蛋白质分解为小肽段。B.质谱分析:使用质谱仪对肽段进
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要寻找显著差异的蛋白质,通常需要利用生物信息学方法进行差异表达蛋白质分析,常用的生信统计方法如t检验、方差分析、Wilcoxon等,这些方法将产生每个蛋白质的差异表达值(例如,fold change,log2(fold change)等)以及统计显著性指标(如p-value或校正后的p-va
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• 荧光定量PCR检测蛋白家族各成员时,有无必要先对扩增产物进行测序,以免李代桃僵?
荧光定量PCR(Polymerase Chain Reaction)是一种用于快速检测和定量DNA或RNA的技术,可以在反应中引入荧光标记物,实时监测PCR产物的增加情况。对于蛋白家族各成员的检测,荧光定量PCR可以用于定量分析它们的相对表达水平,但并不能提供关于具体蛋白序列的信息。因此,对
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我们可以提供二维凝胶电泳的主要流程供您参考: 1.样品准备:首先收集和准备需要进行电泳的蛋白质样品。 2.第一维:等电聚焦(IEF):在第一维电泳中,利用蛋白质在一定pH范围内的等电点(pI,即蛋白质不带电的pH值),使蛋白质在电场中沿pH梯度运动,从而实现分离。
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以下是一种常用的从生物样品中提取细胞质和细胞核的方法,具体的细节可能会因实验的特性和目标而有所不同 : a)样品制备:首先需要制备细胞悬液。这个过程通常包括将细胞从培养皿中剥离、洗涤和悬浮在适当的缓冲液中。 b)细胞离散化:使用酶解剂或机械方法将样品中的细胞离散开。对于动物组织,常
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蛋白质测序中判断氨基酸残基的位点通常依赖于蛋白质序列的N端和C端信息,以及实验测序的结果。常用的方法有以下几种:1.Edman降解法:Edman降解法是一种经典的蛋白质测序方法,通过逐步去除N端的氨基酸并鉴定,逐渐确定蛋白质的N端序列。通过不断重复Edman降解步骤,可以获得蛋白质的完整N端
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