蛋白分析FAQ汇总

• • 如何确定蛋白CD紫外吸光波长？

  若不确定蛋白样品的紫外吸收波长可以先扫个紫外全谱，然后根据最大吸收峰的波长来确定圆二色谱的波长，再扫圆二色全谱并根据最大紫外吸收峰波长进行微调。相关服务:蛋白质圆二色谱分析

• • 蛋白质组学会被基因组学或转录组学取代吗？

  当然不会，蛋白质是基因表达的最终产物，但是与基因之间并没有严格的线性关系，转录组水平也并不对应蛋白质水平，且基因组和转录组水平也看不出蛋白翻译后修饰等现象。相关服务:蛋白质组学

• • 蛋白质组学质谱分析的大概工作流程有哪些？

  蛋白样品上机获得MS谱图-利用搜库软件如MaxQuant等检索质谱下机数据，获得蛋白/肽段的初始信息-进行可信度等质控分析-定性定量分析-数据注释/挖掘等分析相关服务:蛋白质质谱鉴定

• • PRM靶向蛋白质组学定量技术有什么优势？

  相比传统的WB蛋白定量技术,基于质谱的PRM技术不需要抗体标记，操作简单，且特异性、灵敏度和通量都得到了大大的提升。相关服务:MRM/PRM定量蛋白组学分析

• • WB蛋白印迹的原理是什么？

  利用抗体抗原特异性结合的原理，将经SDS-PAGE分离的蛋白质从凝胶上转移至固相薄膜上，再利用抗体特异性结合目标蛋白然后进行显色观察。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务

• • WB的实验流程有哪些？

  WB的实验流程主要包括样本制备、SDS-PAGE电泳分离、转膜、洗脱、抗体杂交和底物显色。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务

• • 如何制备WB蛋白样品？

  常用的制备WB蛋白样本的方法主要有水溶液提取法、有机溶剂提取法、离心柱提取法、层析法以及电洗脱法等，其中离心柱提取法耗时短，简单方便，重复性强且效果好，是比较受欢迎的蛋白提取法。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务

• • 10KD左右大小的蛋白分子做WB怎么选择PV膜？

  可以选择微孔较小的膜或将两张膜叠加在一起，同时缩短转膜的时间。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务

• • WB蛋白印迹显色用DAB还是ECM呢？

  DAB和ECM都各有优缺点，在实际应用时要根据具体的实验目的按需选择。DAB的显色效果比较灵敏，但是具有毒性；ECM的结果比较容易控制，但是灵敏度比起DAB稍差一些。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务

• • 用细胞样本提取蛋白做WB，需要多少细胞？

  一般5×106就足够了。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务