蛋白分析FAQ汇总
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蛋白质质谱可用于鉴定所研究样品的几种不同性质。最简单的是,它可用于蛋白质的质量确定和表征。它还可用于鉴定更复杂的特性,例如翻译后修饰、蛋白质的亚基和蛋白质-蛋白质相互作用。相关服务:蛋白分析
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可以分析任何含有蛋白质和肽的样品,但是使用的方法将取决于样品的类型和所需的结果。相关服务:蛋白鉴定
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蛋白质必须是凝胶条带或冻干的。PVDF 膜上的蛋白质不能通过质谱分析。斑点或条带应染色(例如用考马斯或质谱兼容的银染剂),然后切掉。凝胶片应在微量离心管中风干,然后蛋白质相对稳定,可以通过邮政/快递发送。提供纯净的样品并在低盐缓冲液中,例如 50mM 碳酸氢铵;对于 TRIS 或磷酸盐缓冲液
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1.蛋白样品制备、纯化、酶解;2.iTRAQ试剂标签对产生的肽段进行差异标记;3.将标记的肽段混合在一起进行LC-MS/MS分析;4.质谱数据检索分析定量肽段;5.通过多肽定量值回归到蛋白的定量值。相关服务:基于标签的蛋白质定量技术-iTRAQ,TMT, SILAC
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1.在一次实验中,iTRAQ可以同时标记4至8个样品。操作简单快捷。适用于多个样品的高通量检测,并且实验设计更加灵活;2.iTRAQ是在肽段水平上进行的体外标记,适用于许多类型的生物样品;3.iTRAQ具有重复性好、灵敏度高的特点,可以同时进行定性和定量。相关服务:基于标签的蛋白质定量技术-
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iTRAQ技术的唯一缺陷可以说就是由于附近m/z同位素的干扰所导致的定量不准确。相关服务:基于标签的蛋白质定量技术-iTRAQ,TMT, SILAC
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首先应保证每个样品的蛋白含量不低于50ug。其次,分析的样品数量应在4-8个之间。相关服务:基于标签的蛋白质定量技术-iTRAQ,TMT, SILAC
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理论上任意来源的蛋白只要符合要求都可以进行iTRAQ定量,包括各种动植物、微生物、细菌和病毒蛋白等。相关服务:基于标签的蛋白质定量技术-iTRAQ,TMT, SILAC
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iTRAQ实验一次可同时检测8个样品,一般可以鉴定到3000~5000个蛋白,具体需根据您的样本而定。相关服务:基于标签的蛋白质定量技术-iTRAQ,TMT, SILAC
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iTRAQ标记定量利用标签标记多肽,提高了肽段的离子化效率和可鉴定到的蛋白质数量,基于低分子量端进行定量提高了定量的准确性,且可同时检测多达8种样品;Lable free非标定量不受样本条件限制,基于一级质谱数据对多肽进行定量,对质谱仪的重复性和稳定性要求挺高。iTRAQ在实验周期以及准确度
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