蛋白分析FAQ汇总
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• Nano LC-MS与MALDI-TOF MS相比谁更有优势?
Nano LC-MS的精确性、灵敏性和准确性在一定程度上都优于MALDI-TOF MS。因为Nano LC-MS不仅能检测到肽的总量,还能检测到每个肽的两个连续片段,因此较低丰度的蛋白也能被鉴定到;其次,Nano LC-MS分析中,多肽被HPLC分离,在后续质谱分析中,一个微小的肽也能被鉴定
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• 做蛋白胶条质谱鉴定,需要在跑胶之前对蛋白样品进行浓缩吗?
需要根据蛋白样本的浓度以及上样量来决定,一个蛋白带至少保证含有1pmol蛋白,如果蛋白质样本的浓度在100fmole/ul左右,每个泳道10ul上样量就能满足上样需求。相关服务:蛋白胶点、胶条、IP样品蛋白质鉴定
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质谱法是一种分析技术,用于测量离子的质荷比。质谱图的产生以可视化该比率,这使研究人员能够鉴定和量化简单和复杂混合物中的分子。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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蛋白质质谱可用于鉴定所研究样品的几种不同性质。最简单的是,它可用于蛋白质的质量确定和表征。它还可用于鉴定更复杂的特性,例如翻译后修饰、蛋白质的亚基和蛋白质-蛋白质相互作用。相关服务:蛋白分析
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可以分析任何含有蛋白质和肽的样品,但是使用的方法将取决于样品的类型和所需的结果。相关服务:蛋白鉴定
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蛋白质必须是凝胶条带或冻干的。PVDF 膜上的蛋白质不能通过质谱分析。斑点或条带应染色(例如用考马斯或质谱兼容的银染剂),然后切掉。凝胶片应在微量离心管中风干,然后蛋白质相对稳定,可以通过邮政/快递发送。提供纯净的样品并在低盐缓冲液中,例如 50mM 碳酸氢铵;对于 TRIS 或磷酸盐缓冲液
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1.蛋白样品制备、纯化、酶解;2.iTRAQ试剂标签对产生的肽段进行差异标记;3.将标记的肽段混合在一起进行LC-MS/MS分析;4.质谱数据检索分析定量肽段;5.通过多肽定量值回归到蛋白的定量值。相关服务:基于标签的蛋白质定量技术-iTRAQ,TMT, SILAC
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1.在一次实验中,iTRAQ可以同时标记4至8个样品。操作简单快捷。适用于多个样品的高通量检测,并且实验设计更加灵活;2.iTRAQ是在肽段水平上进行的体外标记,适用于许多类型的生物样品;3.iTRAQ具有重复性好、灵敏度高的特点,可以同时进行定性和定量。相关服务:基于标签的蛋白质定量技术-
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iTRAQ技术的唯一缺陷可以说就是由于附近m/z同位素的干扰所导致的定量不准确。相关服务:基于标签的蛋白质定量技术-iTRAQ,TMT, SILAC
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首先应保证每个样品的蛋白含量不低于50ug。其次,分析的样品数量应在4-8个之间。相关服务:基于标签的蛋白质定量技术-iTRAQ,TMT, SILAC
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