蛋白分析FAQ汇总

• • 什么是自下而上的定量蛋白质组学工作流程？

  自下而上的蛋白质组学是一种常见的基于质谱的工作流程，用于鉴定和定量给定样品中的蛋白质，通过分析蛋白质酶切产生的独特肽段进行。 相关服务:定量蛋白组分析

• • 我可以分析什么样的样品？

  我们主要是一家蛋白质组学机构，因此您能想到的任何蛋白质质谱实验，我们都可以为您提供帮助：凝胶斑点，磷酸化，泛素化，比较样品中的所有蛋白质，SILAC，iTRAQ, TMT，二甲基化，TAILS，定量，蛋白质复合物的免疫沉淀， 二硫化物排列，翻译后修饰。 我们还为化学家运行了一个仪器，这样他们

• • 可以检测重组蛋白吗？

  是的。我们有一个专门的质谱仪来分析完整蛋白质。在 50,000 Da 蛋白质上它精确到约 0.5 道尔顿。该仪器能够发现重组蛋白中的单个二硫键。因此，您不仅可以检查是否表达了正确的蛋白质，还可以获得在 SDS-PAGE 凝胶上永远看不到的结构信息。此外，它比运行凝胶更快。分析一个完整的蛋白质

• • 可以检测化学合成吗？

  是的。我们有专门的质谱仪供化学组测试他们的合成产品。质量精度到小数点后两位。如果您想知道机器是如何工作的，那么我们可以解释，但大多数人只想要结果。我们可以向您展示如何打开预制方法并加载样本，然后按“开始”按钮。相关服务:蛋白分析

• • 质谱 (MALDI) 无法获得蛋白质准确的分子质量的可能原因是什么？

  与SDS PAGE显示的质量不同，可能是因为SDS PAGE的准确性的问题。也可能是由于提取方法或基质导致蛋白质破裂。相关服务:蛋白分子量测定

• • MALDI-MS鉴定出的一些蛋白质的序列覆盖率值较低(<30%)，肽质量指纹识别的序列覆盖率是否有标准可接受的值？

  这需要考虑您正在分析的样本是属于模式生物还是非模式生物，因为这会极大地改变游戏规则——尤其是当您正在运行针对数据库进行肽匹配的自动化算法时。相关服务:蛋白质质谱鉴定

• • 来自 RNA/DNA/蛋白质提取试剂盒的蛋白质是否可在 MALDI-TOF MS 中检测？

  原则上是可以的，主要取决于起始材料的量。相关服务:蛋白质质谱鉴定

• • 可以使用 Trizol（Tri-reagent）进行多反应监测 (MRM) 质谱分析的蛋白质提取吗？

  可以。但在进行消化之前，您可能需要进行缓冲液交换。相关服务:MRM/PRM定量蛋白组学分析

• • 在胰蛋白酶消化前，可以通过离心柱对不同大小的蛋白质进行分离吗？

  离心柱通常用于脱盐，即从小分子中分离蛋白质（或其他大分子）。它们通常不用于分离不同的蛋白质。您可以使用 HPLC 或 UPLC 尺寸排阻色谱法，或自上而下的质谱法。相关服务:蛋白分析

• • 为什么抗磷酸酪氨酸抗体容易出现高背景和/或信号减弱的现象？

  检查是否是封阻出现问题。脱脂奶粉适用于所有蛋白印迹，但磷酪氨酸印迹除外，磷酪氨酸印迹具有与膜结合的磷酸化蛋白。用该试剂进行阻断会导致蛋白存在潜在的表位。稀释该溶液中的抗磷酸酪氨酸抗体将占据许多表位，留下较少的抗体可用于检测。因此建议在TBS+吐温20中使用1%的BSA作为阻断溶液。相关服务: