蛋白分析FAQ汇总

• • 我应该使用 TMT 还是 DIA？

  选择 TMT（串联质量标签）还是 DIA（数据独立采集）分析取决于您有多少样品以及您想要识别多少蛋白质。TMT 分析最适合最大化蛋白质组学深度或磷酸化蛋白质组学分析，但在超过 20 个样本时不实用。DIA 分析最适合包含数十个或数百个样本的大型实验。相关服务:定量蛋白组分析

• • HPLC的基本原理是什么？

  HPLC 的分离原理基于样品化合物在流动相（来自泵）和固定相（在色谱柱中）之间的分布。当通过色谱柱时，化合物基团与固定相的相互作用不同，并根据化学性质被保留，因此发生分离。相关服务:蛋白质质谱鉴定

• • HPLC如何工作？

  泵输送流动相通过装有固定相的色谱柱。自动进样器将样品注入色谱柱。固定相分离样品化合物或分析物。检测器测量从色谱柱分离和洗脱后的分析物。相关服务:蛋白质质谱鉴定

• • HPLC检测器如何工作？

  大多数 HPLC 检测器通过将分析物的物理化学特性转换为电信号来工作。相关服务:蛋白质质谱鉴定

• • HPLC使用哪些类型的检测器？

  HPLC检测器种类繁多。常用的有紫外-可见、荧光、质谱、带电气溶胶、蒸发光散射和折光率检测器。相关服务:蛋白质质谱鉴定

• • 样品中的哪些物质会干扰质谱分析？

  盐、缓冲液、洗涤剂和其他小分子会干扰液相色谱分离和质谱仪源电离。相关服务:蛋白质质谱鉴定

• • 从样品中去除小的污染物以进行质谱分析的最佳方法是什么？

  对于蛋白质样品，Pierce 聚丙烯酰胺旋转脱盐柱（Thermo Fisher）可用于去除盐和其他小分子量的污染物。如果蛋白质含量低，建议使用丙酮沉淀法，前提是样品至少有10µg。对于源自蛋白质消化物的肽样品，可使用 Pierce Peptide Desalting Spin Columns

• • 可以使用蛋白质脱盐柱净化肽样品吗？

  不可以。蛋白质脱盐柱（例如 Zeba 脱盐柱）使用尺寸排阻，并且具有对于肽样品而言通常过高的分子量截止值。肽脱盐使用反相色谱树脂（例如 C18 树脂）结合肽，以在洗涤过程中去除盐分。相关服务:多肽组学

• • 从样品中去除洗涤剂以进行质谱分析的最佳方法是什么？

  使用丙酮沉淀、透析等较容易在蛋白质水平上去除洗涤剂。相关服务:蛋白质质谱鉴定

• • 什么样的缓冲液和溶液与肽净化和 LC-MS 兼容？

  大多数有机溶剂或挥发性缓冲液与 LC-MS 兼容。水和含 0.1% 甲酸的乙腈是质谱分析中分离肽样品最常用的溶剂系统。三氟乙酸 (TFA) 是一种用于离线肽 C18 净化或 LC-UV 分析的替代离子配对剂。相关服务:多肽质谱鉴定