蛋白分析FAQ汇总

• • SDS有害吗？

  被SDS溶液污染，最重要的症状和严重刺激是对眼睛的（灼烧感，发红和视力受损，包括急性和延迟性视力受损-类似于肥皂在眼睛里），另外还刺激皮肤。相关服务:基于SDS-PAGE的蛋白分离

• • 蛋白质在多少pH值下最稳定？

  有论文指出“蛋白质在pH 8.0下是稳定的”。相关服务:基于SDS-PAGE的蛋白分离

• • 蛋白质是酸性的还是碱性的？

  蛋白质通常是几乎中性的分子，也就是说，它们既不具有酸性也不具有碱性。这意味着天冬氨酸和谷氨酸的酸性羧基（―COO−）基团在数量上与具有碱性侧链的氨基酸大致相等。相关服务:基于SDS-PAGE的蛋白分离

• • SDS-PAGE是什么意思？

  它是由Laemmli开发的一种电泳系统。该系统主要用作分离蛋白质。在这种电泳系统的帮助下，我们可以分离分子质量为5-250 kDa的蛋白质。该系统还用于分离复杂混合物中的蛋白质。它会影响将要经历电解过程的蛋白质的分子结构。该电泳系统被用于实现蛋白质的高分辨率分离。相关服务:基于SDS-PAG

• • 为什么使用SDS-PAGE？

  该系统包括传递电流和使样品蛋白质通过凝胶向电极移动的方法。这整个过程被称为SDS-PAGE。它根据质量分离蛋白质。SDS中的离子洗涤剂会变性和附着蛋白质块，使其均匀地带负电。 由于蛋白质迁移速率所依赖的因素之间的差异，PAGE和SDS-PAGE之间存在显著差异。在PAGE中，蛋白质的分离取决

• • 疏水相互作用色谱HIC——如果已经在缓冲液中运行了从高盐到无盐的梯度，但仍然有尚未洗脱的蛋白质时该怎么处理？

  当感兴趣蛋白在用洗脱缓冲液洗涤后仍然粘附在柱子上时，可以使用低浓度的乙醇甚至乙腈。低浓度尿素或盐酸胍也可用于使蛋白质变性并使其从色谱柱中洗脱。此外，也可以使用苛性钠剥离色谱柱以去除不需要的污染物。疏水性较低的 HIC相则不需要对系统使用后梯度改性剂。相关服务:蛋白质纯度分析（分子筛/反相色谱

• • 疏水相互作用色谱HIC——进行HIC分析时pH值是否重要？

  建议在蛋白质最稳定性的pH范围内操作。pH可以影响目标分子从色谱柱中结合和洗脱的效率，但这是特定情况，对于不同的分子，从一个pH值到另一个pH值可能不会显示相同的趋势。 相关服务:蛋白质纯度分析（分子筛/反相色谱）

• • 离子交换色谱——强离子交换树脂和弱离子交换树脂有什么区别？

  术语“强”和“弱”是指官能团的酸/碱性质。 如果配体来源于强酸或强碱，则称为强离子交换树脂。 如果配体来源于弱酸或弱碱，则称为弱离子交换树脂。 相关服务:蛋白质纯度分析（分子筛/反相色谱）

• • 使用离子交换色谱时，如何最大限度地提高目标分子和杂质之间的分离度？

  在离子交换色谱中有许多方法可以实现更好的分离，这些方法也可以应用于其他色谱模式。首先，可以通过增加柱床高度来最大化分辨率。典型的柱床高度范围为15cm-30cm。如果降低线速度，则30cm以上的柱床高度都将导致背压升高而通量降低。柱床高度升高的好处是可以在相同流速下增加样品在色谱柱中的停留时

• • 在什么情况下可选择离子交换色谱进行蛋白质纯化？

  离子交换色谱通常用于从发酵原料中捕获和浓缩目标蛋白质（因为所有蛋白质都具有与其一级结构相关的一些电荷）。相关服务:蛋白质纯度分析（分子筛/反相色谱）