蛋白分析FAQ汇总

• • 你们的蛋白质消化方案是什么？

  如果可能，我们使用SP3 协议或PreOmics iST 试剂盒进行蛋白质消化。在某些情况下，我们使用 FASP、TCA 或 PCT 消化方案。相关服务:定量蛋白组分析

• • 你们提供单细胞蛋白质组学吗？

  我们不支持单细胞蛋白质组学，但我们已经为“低投入”蛋白质组学建立了自动化工作流程。我们可以从大约 2000 个分选的细胞样本中可靠地量化数千种蛋白质，但我们也可以分析只有 500 个或更少细胞的样本。相关服务:组学分析

• • 翻译后修饰分析需要多少蛋白质？

  我们建议蛋白质条带或斑点的浓度足以通过考马斯 G250 染色检测。初始蛋白质鉴定需要两个条带才能进行，尽管该过程可以使用较少的材料。更多的材料会增加获得成功结果的可能性。相关服务:翻译后修饰蛋白组分析

• • MRM（Multiple reaction monitoring）可以分析什么类型的样品？

  基本上任何可以被电离然后碎裂的化合物都可以用于 MRM 分析。最典型的例子是测量复杂混合物（如血浆和血清）中的蛋白质和肽、代谢物或药物。蛋白质定量是可能的，通过对与目标蛋白质相对应的消化肽进行 MRM 实验。这使得 MRM 分析成为生物标志物分析中检测和定量的常见选择。顾名思义，每次分析可以

• • MRM 有多灵敏？

  这是一种高灵敏的技术。可以检测典型质谱方法通常看不到的肽化合物。例如，可以在飞摩尔浓度下准确定量肽。在血浆等复杂样品中，可以在 μg/ml 浓度下对肽进行定量。相关服务:MRM/PRM定量蛋白组学分析

• • MRM 与绝对或相对定量兼容吗？

  该技术可以为任一类型的定量提供结果。相对定量通常很简单，但对于绝对定量，需要适当的标准。对于绝对定量，针对加标的内标（例如合成的稳定同位素标记的肽内标）对特定肽进行定量，以测量蛋白质浓度。相关服务:MRM/PRM定量蛋白组学分析

• • 是否需要方法开发？

  是的。每个项目都是特定的，需要大量的操作时间来开发和运行 MRM 分析。对于复杂的混合物，一些样品可能需要用色谱分离进行净化。对于血浆和血清，需要进行额外的准备工作，并将收取额外费用。相关服务:MRM/PRM定量蛋白组学分析

• • 蛋白质组定量分析需要多少蛋白质？

  iTRAQ 实验的最佳用量是 50 µg 标记蛋白。样品净化过程中的损失可能相当大，并且这是特定于样品的。因此，我们建议提供 200-500µg 的样品，更多的量将提高对低丰度蛋白质的敏感性。相关服务:定量蛋白组分析

• • 什么类型的样品可以进行蛋白质组定量分析？

  细胞裂解物，分泌的蛋白质样品，但不能是放射性样品。注意：分泌的样本必须在无血清/无血浆的培养基中。相关服务:定量蛋白组分析

• • 蛋白质组定量分析样品的最大体积是多少？

  样品体积必须小于 250 µL。相关服务:定量蛋白组分析