蛋白分析FAQ汇总

• • 可以使用蛋白酶抑制剂吗？

  可以，蛋白酶抑制剂将减少蛋白质降解。相关服务:蛋白分析

• • 正在查看的蛋白质组在当前可用的数据库中存在是否重要？

  是的，因为蛋白质组分析不适用于未知基因组的样本。相关服务:组学分析

• • 从一条凝胶条带中可以鉴定出多少种蛋白质？

  这取决于加载在凝胶上的样品的复杂性。根据我们的经验，我们已经从复杂的细胞裂解物在 12%T minigel 上运行后的一条凝胶条带中鉴定出多达 70 种蛋白质。我们强烈建议不要使凝胶过载，因为它会影响蛋白质的分辨率和分离。此外，它可能导致 LC 中大量肽的“携带”，从而导致在不同样品中重复鉴

• • 可以提交银染凝胶吗？

  可以，如果它是通过质谱兼容的银染流程染色的。许多商业供应商出售此类试剂盒。相关服务:蛋白胶点、胶条、IP样品蛋白质鉴定

• • 是仅使用胰蛋白酶消化蛋白质还是可以使用其他蛋白质水解酶？

  如果要对样品进行“溶液内消化”，可以使用市售的测序级蛋白水解酶中的任何一种或组合。对于“凝胶内消化”，可用蛋白水解酶变得更加有限。请注意，许多高分子量酶在凝胶内消化方面的效率不如胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶。相关服务:蛋白分析

• • 样品中有洗涤剂，有没有办法去除它？

  是的。最简单和最便宜的方法是使用 TCA 和丙酮沉淀等沉淀技术。这些方法的缺点是一旦沉淀，一些蛋白质很难再悬浮在目标缓冲液中。我们提供使用 Pierce 洗涤剂去除试剂盒来去除洗涤剂的服务。我们已成功使用该试剂盒从样品中去除辛基麦芽糖苷和 SDS。应该注意的是，所有技术的成功都取决于洗涤剂的

• • 我的蛋白质复合物在盐浓度非常高的缓冲液加 5% 甘油中。这种缓冲液与质谱兼容吗？

  不兼容。盐和甘油与质谱不兼容。如果样品含有盐或甘油，我们将使用 zip 吸头或 C18 离心柱对样品进行脱盐。相关服务:蛋白质质谱鉴定

• • 影响质谱结果的一般因素有哪些？

  质谱鉴定不成功主要分为两类。一个原因是质谱无效，另一个原因是蛋白质数据库没有参考数据。导致质谱结果不成功的原因可细分为：（1）蛋白点过浅，蛋白含量过低；(2)蛋白点太小，不利于操作；（3）虽然用二维电泳分离，但蛋白点仍是几种蛋白质的混合物；(4)蛋白质水解和质谱误差。 为了避免这些因素，需

• • 串联质谱和质谱测序有什么区别？

  质谱鉴定通常使用软件自动匹配现有数据库以获得结果。而质谱测序需要根据质谱图中相邻或相似峰的分子量差异直接计算肽段序列。相关服务:蛋白性质分析

• • 未知蛋白质是用质谱测序还是用蛋白质测序仪测序？

  更简单的方法是质谱，且成本也不贵。如果质谱不能确定，也可以结合N端测序。这两个数据组合分析基本可以确定目标蛋白。相关服务:序列分析