蛋白分析FAQ汇总

• • 如何寄送样品？

  样品通常通过快递运送到我们的实验室，在送出样品前联系我们了解更多详情。相关服务:样品制备

• • 检测肽纯度的常用方法是什么？

  常使用高效液相色谱法（high performance liquid chromatography，HPLC)检测肽纯度。相关服务:肽纯度分析

• • 肽含量和肽纯度有什么区别？

  肽不仅包含正确的肽，还包含杂质（例如水和生产中的有机盐）。肽纯度是指相对于除水分以外的所有杂质的正确肽的数量。然而，肽含量是靶向肽相对于样品中其他所有物质的百分比，通常由N元素分析和氨基酸分析确定。因此，即使肽纯度达到99%，考虑到水和有机盐的肽含量仍可能为70%-80%。相关服务:肽纯度分

• • 肽分离纯化最常用的技术是什么？

  肽分离纯化最常用的技术是反相高效液相色谱 (RP-HPLC)。相关服务:肽纯度分析

• • 反相高效液相色谱（RP-HPLC）中通常使用哪种流动相进行肽分离和纯化？

  最常见的流动相是水和乙腈，三氟乙酸（TFA）充当离子对试剂。根据不同的肽段，采用合适的梯度洗脱进行肽段分离。相关服务:肽纯度分析

• • 为什么在流动相中添加三氟乙酸（TFA）作为离子对试剂？是否有任何其他流动相或离子对试剂可用于肽分离和纯化？

  三氟乙酸（TFA）可用于调节流动相的pH值，作为离子对试剂与多肽相互作用，增强分离效果并显著改善峰形。 其他用于多肽分离纯化的流动相或离子对试剂，包括乙酸体系、磷酸体系、盐酸体系、七氟丁酸等，均可通过调节pH并达到很好的分离效果。相关服务:肽纯度分析

• • 如何溶解多肽？

  大多数肽可以溶解在超纯水中，对于一些不溶性肽，需要先分析其氨基酸序列。酸性肽可先溶于少量碱性溶液（如0.1%氨水），然后稀释至所需浓度。碱性肽则可溶于少量酸性溶液（如乙酸、三氟乙酸），然后稀释至所需浓度。对于疏水性肽，可溶于强极性有机溶剂（如二甲基甲酰胺（DMF）、甲醇、丙醇、异丙醇、二甲基

• • 在反相高效液相色谱（RP-HPLC）中通常使用什么作为色谱填料？

  最常见的填料是 C18、C8 和 C4 反相色谱柱。相关服务:肽纯度分析

• • 您能详细介绍一下iRT肽/蛋白质吗？

  在数据集中，iRT肽/蛋白质是消化后添加的标准肽混合物。当您选择iRT标准时，Skyline会在其用户界面中提供完整列表。相关服务:DIA定量蛋白质组学

• • 在鉴定的iRT蛋白中，一些肽呈红色，少数呈绿色。红色肽段是否表明鉴定可信度低？

  如果您忘记切换到“Integrate All”，这可能会使它们全部变绿。在这种情况下，它表明离子对共流出的效果，并不能表征鉴定的质量。该功能最初旨在帮助选定反应监测（SRM）的离子对细化，以帮助鉴别没有为峰组贡献“well-formed”信号的离子对。可能是由于干扰或只是下降到量化的下限以下