蛋白分析FAQ汇总
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蛋白质必须是凝胶条带或冻干的。PVDF 膜上的蛋白质不能通过质谱分析。斑点或条带应染色（例如用考马斯或质谱兼容的银染剂），然后切掉。凝胶片应在微量离心管中风干，然后蛋白质相对稳定，可以通过邮政/快递发送。提供纯净的样品并在低盐缓冲液中，例如 50mM 碳酸氢铵；对于 TRIS 或磷酸盐缓冲液
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1.蛋白样品制备、纯化、酶解；2.iTRAQ试剂标签对产生的肽段进行差异标记；3.将标记的肽段混合在一起进行LC-MS/MS分析；4.质谱数据检索分析定量肽段；5.通过多肽定量值回归到蛋白的定量值。相关服务:基于标签的蛋白质定量技术-iTRAQ，TMT， SILAC
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1.在一次实验中，iTRAQ可以同时标记4至8个样品。操作简单快捷。适用于多个样品的高通量检测，并且实验设计更加灵活；2.iTRAQ是在肽段水平上进行的体外标记，适用于许多类型的生物样品；3.iTRAQ具有重复性好、灵敏度高的特点，可以同时进行定性和定量。相关服务:基于标签的蛋白质定量技术-
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iTRAQ技术的唯一缺陷可以说就是由于附近m/z同位素的干扰所导致的定量不准确。相关服务:基于标签的蛋白质定量技术-iTRAQ，TMT， SILAC
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首先应保证每个样品的蛋白含量不低于50ug。其次，分析的样品数量应在4-8个之间。相关服务:基于标签的蛋白质定量技术-iTRAQ，TMT， SILAC
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理论上任意来源的蛋白只要符合要求都可以进行iTRAQ定量，包括各种动植物、微生物、细菌和病毒蛋白等。相关服务:基于标签的蛋白质定量技术-iTRAQ，TMT， SILAC
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iTRAQ实验一次可同时检测8个样品，一般可以鉴定到3000～5000个蛋白，具体需根据您的样本而定。相关服务:基于标签的蛋白质定量技术-iTRAQ，TMT， SILAC
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iTRAQ标记定量利用标签标记多肽，提高了肽段的离子化效率和可鉴定到的蛋白质数量，基于低分子量端进行定量提高了定量的准确性，且可同时检测多达8种样品；Lable free非标定量不受样本条件限制，基于一级质谱数据对多肽进行定量，对质谱仪的重复性和稳定性要求挺高。iTRAQ在实验周期以及准确度
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差异蛋白通常需要借助差异倍数和P值两个参数来确定，一般当两种蛋白的差异倍数达到1.3-2倍且统计检验的P值小于0.05时即视为差异蛋白。相关服务:差异表达蛋白质统计分析
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Lable free非标记定量通过质谱检测到的肽段离子峰强度以及质谱的分析次数来进行定量，肽段离子的丰度与其被质谱检测到的次数成正比，通过两者关系的数学公式将质谱计数与肽段含量联系起来而对肽段进行定量。相关服务:基于LABEL FREE的定量蛋白组分析
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