蛋白分析FAQ汇总

• • 从头测序服务对样品有什么要求？

  纯度大于95%。大于500ug的蛋白质。相关服务:从头测序

• • 对于从头测序服务，最终交付成果包括哪些内容？

  我们将提供每条链的序列、修饰和覆盖范围。相关服务:从头测序

• • 如何知道从头测序服务的序列是否正确？

  这些序列基于质谱数据。根据我们的经验，我们向客户报告的序列正确率超过 99%。相关服务:从头测序

• • 纯化中如何选择色谱填料？

  具有不同序列的肽在理化特性和疏水性方面表现出很大差异。 在大多数情况下，C18 色谱柱对分子量小于 4000 或亲水性的肽段表现出最佳分离效果。 C4 柱适用于分子量超过 5000 或含有疏水末端的肽段。 C8柱介于C18柱和C4柱之间，其效果与C18柱类似。 对于一些特殊的选择性肽段，也可

• • 纯化中选择聚合物填料的原理是什么？

  当要求更高的 pH 或温度时，选择pH范围更宽的聚合物 HPLC 柱可能适用于纯化。 它们在极端pH条件下不会降解，因此可以使用强酸和强碱作为流动相进行分离和纯化。相关服务:肽纯度分析

• • 影响多肽纯化的因素是什么？

  影响多肽纯化的因素很多，主要包括流动相、色谱柱类型、柱温、波长、色谱仪性能等。 这些差异可能会导致最终结果出现错误。相关服务:肽纯度分析

• • 频繁的基线漂移可能是什么原因？ 如何解决？

  反相分离中基线漂移的主要原因是固定三氟乙酸（TFA）浓度的梯度洗脱会导致 210-220 nm 处的吸收基线发生偏移。 建议使检测波长尽可能接近215 nm，以减少或消除由TFA吸收光谱变化所引起的基线漂移。此外，与溶剂B相比，通过在溶剂A中添加15% TFA来补偿基线漂移。例如，如果溶剂

• • 反相色谱纯化后，如何从最终产品中去除流动相中的三氟乙酸（TFA）、乙腈等杂质？

  只要不超出耐受范围，冻干可能是去除大部分三氟乙酸（TFA）和乙腈的最简单和最有效的方法。 但该方法不能满足一些对TFA含量要求较高的多肽类药物的要求， 应与它们进行特殊的盐转化和脱盐处理。相关服务:肽纯度分析

• • 肽的一般盐形式有哪些？ 如何转换盐形式或脱盐？

  大多数肽在三氟乙酸（TFA）体系下纯化，因此TFA盐是最常见的形式，其次是乙酸盐和盐酸盐形式，很少有肽药物是特殊盐形式。 离子交换和高效液相色谱（HPLC）是最常用的盐转化方法，而 G25（GE Healthcare 的葡聚糖凝胶）柱可用于脱盐。相关服务:肽纯度分析

• • 选择色谱设备时要考虑什么？

  规模/流量、自动化、耐压、传感器、易于使用的软件、服务等。相关服务:蛋白质质谱鉴定