蛋白分析FAQ汇总
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凝胶过滤色谱常用的过滤物质是琼脂糖或聚丙烯酰胺珠,重力或低压系统用葡萄糖,中压系统用聚合树脂。介质的选择取决于待分离组分的性质和其他实验因素。相关服务:蛋白质纯度分析(分子筛/反相色谱)
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尺寸排阻色谱(SEC)是一种色谱技术,用于根据分子大小或更准确地说-流体动力学体积来分离物质。相关服务:蛋白质纯度分析(分子筛/反相色谱)
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凝胶过滤色谱,也称为尺寸排阻色谱,用于分离不同大小的分子。除了分离不同大小的不同蛋白质外,还可以解析特定蛋白质的低聚形式。相关服务:蛋白质纯度分析(分子筛/反相色谱)
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常用的凝胶过滤基质由交联聚丙烯酰胺、琼脂糖、葡聚糖或它们的组合组成的多孔珠组成,并以悬浮形式或干燥粉末形式提供。相关服务:蛋白质纯度分析(分子筛/反相色谱)
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• 圆二色谱分析——如何用圆二色谱(CD)光谱查看吸光度光谱?
确保在CD模式下勾选吸光度选项。收集或加载一个涵盖波长范围、带宽和步长的背景测量值,以便在CD扫描期间计算吸光度信号。相关服务:蛋白质圆二色谱分析
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• 圆二色谱分析——用于圆二色谱(CD)分析的样品的最佳吸光度是多少?
约0.9 AU的吸光度可确保最佳的信号:噪声水平。通常,任何吸光度超过2 AU的CD数据都是不可靠的,因为样品和缓冲液吸收大于99%的光。相关服务:蛋白质圆二色谱分析
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• 圆二色谱分析——缓冲液组分可能会干扰圆二色谱(CD)分析,该怎么办?
远紫外区域(通常为260-180 nm)的CD分析可能受到在较低波长下某些缓冲液组分的高吸光度的影响。为了减少高吸收缓冲液的影响,并在达到2AU限制之前使测量深入紫外线,请使用具有较短光程的流通池或比色皿。相关服务:蛋白质圆二色谱分析
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• 圆二色谱分析——减少噪声是使用多次重复扫描更好,还是增加每点采样时间更好?
CD光谱中的噪声水平可以通过增加每点采样时间设置或平均重复扫描来降低——每种方法都会产生相同的结果。重复扫描会产生一系列更快的扫描,可以快速识别和纠正不适当的设置,但确实需要数据处理来平均最终频谱。增加每点时间设置可生成无需进一步数据处理的单一频谱。相关服务:蛋白质圆二色谱分析
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CD光谱背景产生的信号接近于零,但可能揭示由光学元件和探测器的双折射特性引起的微小特征。基线不应随时间而变化,并在CD数据的正常处理过程中减去,即缓冲频谱减去。相关服务:蛋白质圆二色谱分析
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当系统空闲时,自动快门可防止单色器暴露在远紫外线下。快门在测量开始前打开,在测量完成时关闭。相关服务:蛋白质圆二色谱分析
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