蛋白分析FAQ汇总
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SDS是一种具有强烈蛋白质变性作用的洗涤剂，并以恒定的摩尔比与蛋白质骨架结合。SDS处理的蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳使研究人员能够以简单，廉价和相对准确的方式根据其长度分离蛋白质。相关服务:基于SDS-PAGE的蛋白分离
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SDS与蛋白质强结合，当SDS以0.1%存在时，大约一个洗涤剂分子与两个氨基酸结合。当与SDS一起煮沸时，蛋白质会获得与其分子大小成比例的负电荷，从而根据分子大小在丙烯酰胺凝胶中移动。相关服务:基于SDS-PAGE的蛋白分离
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较小的蛋白质被保留的较少，因此移动得更快。SDS不仅为蛋白质提供强的负电荷，而且还使蛋白质变性，从而使每个蛋白质大致呈球形，消除了会影响电泳迁移率的蛋白质形状差异。相关服务:基于SDS-PAGE的蛋白分离
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由于孔径的差异，每个尺寸排阻柱都有一个可以分离的分子量范围。在SEC中，排阻极限是色谱柱工作范围上限处的分子量，超过该值，分子就会因太大而无法被困在固定相中，并将在色谱柱的空隙中被洗脱。许多SEC填料都是由其排阻极限所指代的。 同时，工作范围的下限被定义为渗透极限，即小到足以穿透固定相的所有
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尺寸排阻色谱（SEC），又称凝胶过滤色谱或分子筛色谱，是一种根据分子大小分离分子的色谱方法，广泛用于蛋白质纯化和聚合物表征。 多孔基质在SEC中被用作固定相，由于空间位阻的原因，被分析物具有不同的通道。大分子被基质排阻因此将被首先洗脱，而被孔隙捕获的小分子将有更长的通路因此稍后被洗脱。分析物
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在选择用于蛋白质分析的 SEC 色谱柱时，需要考虑许多参数。分辨率是最重要的参数之一，它受到几个因素的影响，包括： 树脂性能，如树脂化学成分、颗粒（珠）尺寸和尺寸分布、孔径和选择性，以及分馏范围； 色谱柱相关因素，如色谱柱长度和色谱柱填料效率； 运行条件，如样品体积和进样技术、缓冲液成分和流
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尺寸排阻柱床有三个功能组成分：孔隙体积，空隙体积和基质体积（床体积）。孔隙体积是指颗粒内的孔-腔空间。空隙体积是指排阻的体积，即颗粒之间的空间。相关服务:蛋白质纯度分析（分子筛/反相色谱）
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对称的洗脱峰表明填料的均匀性。柱的内部体积（Vi）可以通过从具有K d-1.0的小分子如葡萄糖或酪氨酸的洗脱体积中减去空隙体积来确定。柱的总体积（Vt）是空隙体积和内部体积的总和。相关服务:蛋白质纯度分析（分子筛/反相色谱）
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空隙体积特指柱内所含流动相的体积。同一术语有时也非正式地用于指柱/管或配件中空腔的体积。空隙体积也被称为死体积。相关服务:蛋白质纯度分析（分子筛/反相色谱）
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选择具有提供所需分辨率的床高的色谱柱。制备分离建议床高在30至100厘米之间。选择适合需要处理的样品体积的色谱柱尺寸。选择保持分辨率和最小化分离时间的最高流速。相关服务:蛋白质纯度分析（分子筛/反相色谱）
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