蛋白分析FAQ汇总

• • PAGE和SDS-PAGE之间有什么区别？

  原始PAGE和SDS-PAGE之间的主要区别在于，原始PAGE中蛋白质迁移速率取决于蛋白质的质量和结构，而SDS-PAGE中蛋白质迁移速率仅由蛋白质的质量决定。 在原始PAGE中，蛋白质样品在非变性和非还原性缓冲液中制备。因此，除了蛋白质的大小外，其二级、三级和四级结构都对迁移有影响。 在S

• • SDS-PAGE和蛋白质印迹（western blot）有什么区别？

  SDS-PAGE是一种按质量分离蛋白质的电泳方法。蛋白质印迹是一种分析技术，用于识别复杂蛋白质混合物中特定蛋白质的存在，其中凝胶电泳通常用作分离目标蛋白质的程序的第一步。SDS-PAGE是目前用于蛋白质印迹的最常见的凝胶电泳类型。相关服务:基于SDS-PAGE的蛋白分离

• • 什么是尺寸排阻色谱（SEC）中的空隙体积？

  SEC中的空隙体积是洗脱分子使其在固定相中保留率为零所需的流动相体积。在理想情况下，它等于柱中流动相的体积，即固定相之间的孔隙和空间的体积。空隙体积通常表示为总色谱柱体积的百分比。例如，如果固定相的颗粒占总柱的70%，则空隙体积将占总柱体积的30%。相关服务:蛋白质纯度分析（分子筛/反相色谱

• • 免疫印迹和免疫沉淀有什么区别？

  免疫沉淀涉及使用抗体和琼脂糖珠从溶液中分离目标蛋白，而蛋白质印迹（也称为免疫印迹）使用凝胶电泳和抗体探针来分析蛋白质。 免疫沉淀可用于处理蛋白质的天然构象；然而，免疫沉淀中的蛋白质通常需要放射性标记。免疫印迹不需要对蛋白质进行放射性标记，也更有助于确定蛋白质的量和大小，但它所需的抗原浓度比免

• • 尺寸排阻色谱（SEC）在生物化学中的用途是什么？

  SEC的主要应用如下： 分子和复合物的分馏； 去除大颗粒蛋白质和复合物； 去除小分子，如染料、引物和污染物； 缓冲液交换； 脱盐； 蛋白质结合研究； 分子量测定。相关服务:蛋白质纯度分析（分子筛/反相色谱）

• • 什么是蛋白质翻译后修饰发现？

  通过将蛋白质消化成肽来鉴定蛋白质翻译后修饰（PTMs）。使用串联质谱 (LC-MS/MS) 分析所得的肽，然后使用 X!tandem、SEQUEST 或其他专用 PTM 软件在数据库搜索修饰。观察到的翻译后修饰通常通过人工验证，并产生一个似然分数。但是，结果可能会因使用的特定程序而异。 如果

• • 在什么时候高丰度蛋白质去除有用，主要应用是什么？

  当需要高分辨率的进样蛋白质时，当目的是分析许多蛋白质并且没有针对单个蛋白质的特异性检测时，高丰度蛋白质去除会增加许多分析的价值。这些类型的分析的例子就是2D电泳/DIGE。相关服务:2D-DIGE定量蛋白质组学

• • 为什么在二维图形中有垂直间隙？

  IPG 带和第二维凝胶顶表面之间存在气泡。需确保在 IPG 带和第二维凝胶的顶表面之间没有气泡。相关服务:2D-DIGE定量蛋白质组学

• • 2D DIGE——可以扫描附着在玻璃板上的凝胶吗？

  如果扫描附着在玻璃板上的凝胶，则必须使用低荧光玻璃板。相关服务:2D-DIGE定量蛋白质组学

• • 什么是SWATH？

  标准的鸟枪法蛋白质组学使用数据依赖性采集（DDA），而SWATH分析是数据独立采集（DIA），这意味着它按顺序记录样品中每个分子的MS/MS谱图。SWATH是由ETH Zürich的Dr. Ruedi Aebersold团队与AB SCIEX共同研发的一项全新的质谱采集模式技术。相关服务:S