蛋白分析FAQ汇总
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理想情况下,内标物在样品制备过程中可能通过意外稀释、化学降解、蒸发、移液损失、表面吸附等与样品以相同的速率损失。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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质谱在区分不同质量的相同化学物质(同位素)的能力上是独一无二的。大多数同位素具有难以区分的化学和物理性质。例如,CH337Cl和CH335Cl具有难以区分的沸点、电子光谱、介电常数、反应性、溶解度等,但即使廉价的质谱仪也能完全区分。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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放射性同位素是那些通过α、β、γ、电子俘获、正电子发射等衰变的同位素。除了纯γ发射体外,其他所有发射体都会在这一转变过程中改变化学特性和质量。相关服务:定量蛋白组分析
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许多类型的凝胶都与质谱分析兼容,例如传统的聚丙烯酰胺凝胶和许多商业预制凝胶,包括 Thermo NuPAGE Bis-Tris 和 Tris-Acetate 凝胶。对于蛋白质鉴定,我们没有观察到由不同凝胶引起任何显著影响。然而,根据我们的经验,我们建议不要使用 Tricine 凝胶进行蛋白质
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当你从凝胶上切蛋白质条带时应该小心。第一,避免凝胶直接接触裸手或任何潜在的脏表面。第二,全程戴干净的手套,将凝胶放在超净塑料盒上。第三,用合适大小的超净刀片切出感兴趣的蛋白质条带。如果您需要切出多个条带,请避免对不同的凝胶条带标记错误。相关服务:蛋白胶点、胶条、IP样品蛋白质鉴定
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质谱(Mass Spectrometry,简称 MS)测量样品中一种或多种分子的质荷比。各种质谱分析技术可用于确定分子的确切分子质量,提供有关化合物的组成和结构信息,并可用于简单或复杂混合物中的化合物的定量。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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多反应监测 (MRM,也称为选择性反应监测 (SRM)) 是一种特异和灵敏的质谱技术,可准确定量目标蛋白质。利用有同位素标记的内标,该技术可以在单一液相色谱串联质谱 (LC-MS/MS) 实验中对复杂系统中的大量蛋白质进行有针对性的绝对定量。相关服务:MRM/PRM定量蛋白组学分析
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质谱分析蛋白质,例如在 HDX 实验中,可以使用两种不同的方法进行:“自下而上”和“自上而下”蛋白质组学。在自下而上的实验中,蛋白质被特定蛋白酶(例如胰蛋白酶)消化成肽段,肽段通过液相色谱分离,然后在质谱仪上分析。然后将收集到的所有肽段的信息与已知的氨基酸序列进行比对,从而提供目标蛋白质的高
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• 到目前为止,还没有为质谱工作跑 SDS-PAGE。跑凝胶时应该采取哪些预防措施以获得最佳结果?
我们的建议有以下几个方面; a) 清洁整个凝胶运行装置,在所有步骤中使用新手套,并在整个过程中保持表面清洁!!! b) 使用新鲜制备的缓冲液,染色剂不要重复使用。 c) 将样品加到凝胶上时,样品要与任何其他对照(如全细胞裂解物等,如果有的话)隔离,以避免交叉污染。最好在单独的凝胶中跑样品,与
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物种信息是自下而上蛋白质组学工作流程的核心,用于识别目标蛋白质。因此,如果您知道物种/属/有机体,请在服务申请表上提供信息。如果您知道但由于保密问题而无法共享此信息,我们将在 Swissprot 数据库中对您的结果进行一般搜索,并为您提供蛋白质列表。如果您知道您的蛋白质来自未注释的生物体,请
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