应该在什么缓冲液中提交样本？
如果您向我们提供蛋白质水平的样品，我们将进行蛋白质消化和肽净化。理想情况下，蛋白质应在相当“中性”pH 的水性缓冲系统中提交。蛋白质组学中常用的缓冲液是：Tris，pH 范围 7.0 - 9.0；HEPES，pH 范围 7.2 - 8.2；碳酸氢铵 NH4HCO3，pH 范围 7.0 – 8.0。通常这些缓冲液的使用浓度在 50-100 mM 之间。其他添加剂：除了缓冲分子，可以将其他添加剂添加到裂解缓冲液中，以提高蛋白质的溶解度和稳定性（但同时会使它们变性，即蛋白质不再处于其天然折叠结构。如果天然折叠和蛋白质活性是必需的，应使用其他裂解缓冲液）。蛋白质组学中典型的变性添加剂是洗涤剂，例如 8M尿素；2% 脱氧胆酸钠 (SDC)；2% 十二烷基硫酸钠 (SDS)。 它们有助于溶解难溶性蛋白质，但它们也需要良好的样品净化方案，因为样品需要不含洗涤剂才能进行质谱分析。此外，还原剂，如 1 mM DTT（二硫苏糖醇）；5 mM TCEP（三（2-羧乙基）膦）经常被添加，因为它们有助于减少氧化损伤并通过切割二硫键使蛋白质变性。裂解缓冲液中的其他典型添加剂是，蛋白酶抑制剂（防止蛋白质的非特异性切割）、磷酸酶抑制剂（防止磷酸化变化）、金属螯合剂（如 EDTA，结合金属离子）、盐（以保持缓冲液的离子强度）。蛋白质组学中使用的典型细胞裂解缓冲液是：8 M 尿素；100 mM NH4HCO3；1 mM DTT；(5 mM EDTA)；酸碱度 8.0。如果您向我们提供肽级样品（蛋白质消化和肽清洁在您的实验室发生过），理想情况下请提供完全干燥的肽（以便我们可以将它们重新悬浮在适合质谱的溶剂中）或将它们在高纯水（最好是质谱级）和最高 2% 乙腈和 0.1% 甲酸中提供给我们。对于微流样品，需要 0% 乙腈。重要的是，请与我们分享您的特定缓冲液成分！然后，我们可以做出明智的决定并为您提供相应的建议。
How to order?
