蛋白分析FAQ汇总

• • 如何从凝胶上切割蛋白质条带/斑点？

  使用一个新的干净的刀片切出所需的蛋白质带/点。始终戴着手套在干净的玻璃板上切割凝胶。将凝胶片放入新 Eppendorf 管中。即可用于蛋白质鉴定分析。相关服务:蛋白胶点、胶条、IP样品蛋白质鉴定

• • 什么是角蛋白，如何避免样品被角蛋白污染？

  角蛋白是一种天然存在的蛋白质，存在于例如头发、死皮、乳胶手套、DTT、缓冲液和羊毛衣物中。通过穿着实验室服和非乳胶手套最大限度地减少角蛋白污染是必不可少的。此外，所有与凝胶接触的东西都应该没有灰尘，例如，用 70% 乙醇清洗。在干净的工作区域（如层流罩）进行凝胶内消化。相关服务:蛋白胶点、胶

• • 蛋白质鉴定的原理是什么？

  蛋白水解消化产生肽。如果在凝胶内消化，则从凝胶块中提取肽。在小规模 HPLC 材料上进行肽净化和浓缩。通过 MALDI 质谱或 ESI-LC 质谱进行 MS 和 MS/MS 分析。通过 Mascot (MatrixScience) 等软件搜索蛋白质氨基酸序列数据库。相关服务:蛋白鉴定

• • 什么是序列覆盖？

  序列覆盖表示通过质谱观察到的肽段中发现的蛋白质序列中氨基酸的数量。相关服务:蛋白质质谱鉴定

• • 你们能鉴定蛋白质修饰并进行更详细的蛋白质表征吗？

  我们提供多种翻译后修饰服务，包括二硫键分析和糖基化分析。除此之外，我们还提供物理化学和结构特性的测定。相关服务:翻译后修饰蛋白组分析

• • 你们能从蛋白质印迹中鉴定蛋白质吗？

  我们可以通过胰蛋白酶消化，然后进行 nanoLC-MS/MS 肽分析和数据库搜索，在从 1D SDS PAGE 中切除的凝胶带中鉴定出几种蛋白质。相关服务:蛋白胶点、胶条、IP样品蛋白质鉴定

• • 你们能鉴定一个凝胶条带中的多种蛋白质吗？

  我们可以通过胰蛋白酶消化和随后的nano LC-MS/MS 肽分析鉴定凝胶条带中的多种蛋白质。我们在UniProt数据库中搜索所有已知的蛋白质。相关服务:蛋白胶点、胶条、IP样品蛋白质鉴定

• • 我没有得到阳性蛋白质鉴定。什么地方出了错？

  这个问题可能是由几个问题引起的。也许您样品中的蛋白质不存在于 UniProt 数据库中，例如，如果蛋白质是全新的并且生物体基因组未测序。相关服务:蛋白鉴定

• • 什么是分子量测定？

  分子量或分子质量是一个分子基于其各个原子的原子质量的总质量。通过提供具有低测量误差（百万分之几，ppm）的质量测定，质谱可以精确测定分子组成。相关服务:分子量测定

• • 如何使用质谱服务进行肽图谱分析？

  肽图谱通过确定蛋白质氨基酸序列，利用内切蛋白酶（酶）产生肽，然后通过 HPLC 与质谱联用进行分析，被用于确认蛋白质一级结构。重要的是，肽图谱还可以定位翻译后修饰 (PTMs) ，包括： N-和O-糖基化 ；N端焦谷氨酸 ；乙酰化/甲酰化；C端赖氨酸剪裁；蛋白质稳定性指示修饰，包括脱酰胺和氧