蛋白分析FAQ汇总
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对于此类分析,您的样品应满足以下标准:最小体积:5 µl 以上;最低推荐浓度:1-5 pmol/µl(最佳浓度:10-500 pmol/µl);如果可能,溶解在挥发性溶剂中(不含非挥发性缓冲剂、盐、去污剂、甘油等);可以提交含有盐和缓冲液的样品(我们将在分析之前在 ZipTips 上将它们脱
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• 公司将提供什么作为质量测定实验 (MALDI/ESI) 的结果?
生成的质谱将以 pdf 格式或 Excel 电子表格形式提供。对于 ESI 数据,还将提供一个解卷积中性质量M的列表。原始数据将根据要求提供(txt文件)。相关服务:分子量测定
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鉴定未知蛋白质的第一步是使用蛋白酶(例如胰蛋白酶)消化蛋白质。我们接受以下样品:考马斯亮蓝染色的凝胶条带(尽可能避免银染);溶液(不含蛋白酶抑制剂!),根据缓冲液成分可能需要非标准流程(请在订单中提供详细信息),限制 SDS 的量并避免 CHAPS/Tween;珠子(最好是磁性的),请注意,
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这取决样品类型:蛋白质提取/下拉产物,最小推荐量1 µg(可以使用更少的材料);蛋白质确认(“纯化”蛋白质),最小推荐量50 – 250 fmol(最佳量:1 pmol)。相关服务:蛋白鉴定
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对于蛋白质鉴定实验,结果通常包括:Pdf 报告,包含使用的方案的信息和对结果的评论;Scaffold 文件,包含使用 Mascot 搜索引擎获得的所有结果。有关其他信息请参阅数据分析部分;在需要时(例如,当使用自定义数据库时)提供使用替代搜索引擎(例如PEAKS,Byonic)获得的结果。相
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• 能鉴定出蛋白质上的所有翻译后修饰 (PTMs) 吗?分析需要多少材料?
无法对一种蛋白质的所有 PTMs 进行表征,因为它们的丰度通常很低,并且需要 PTM 特定的富集流程。此外,在数据中搜索一组不受限制的 PTM 会导致大量的假阳性鉴定。PTMs,如磷酸化、(二)甲基化、泛素化、乙酰化,如果是先前富集的样品(例如下拉),可以在没有 PTM 富集的情况下鉴定。对
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只有纯化的或低复杂度的蛋白质样品才能有效地进行二硫键分析。可能需要用多种酶进行消化。推荐量:10 µg(最小推荐量:1-2 µg)。 相关服务:蛋白二硫键鉴定和定量分析
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根据样本的复杂性,将通过 MALDI(Triplet Signature Pattern 的鉴定) 或 LC-MS (使用软件Byonics (Protein Metrics)) 进行分析。报告将包括 pdf 结果文件,它描述了连接的二硫肽的 MS 和 MS/MS 数据,以及 Byonics
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N端和C端蛋白质的鉴定取决于它们的蛋白质物理化学性质。通过 MALDI-ISD(源内片段化)对完整蛋白质的简单分析对于纯化的蛋白质可能是成功的。对于 N 端分析,实施基于 N 端标记的替代方法(例如二甲基标记)。对于N 端的大规模鉴定(例如蛋白酶底物的鉴定),我们提供TAILS方法。相关服务
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根据您的生物学问题,我们可以为您提供以下支持:大规模(蛋白质组范围)相对蛋白质定量;靶向蛋白质分析(分析多个样品中的几个蛋白质目标)。相关服务:定量蛋白组分析
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