蛋白分析FAQ汇总
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蛋白质组学可以分析任何含有蛋白质和肽的样品;但是使用的方法将取决于样品类型和所需结果。相关服务:蛋白质组学
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国际蛋白质组学提供蛋白质和肽及其翻译后修饰的分析。相关服务:蛋白质组学
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质谱法是获得蛋白质序列信息的最先进技术,因为它快速且成本有效。鉴定1种蛋白质:使用MALDI-TOF/TOF(PMF+MS/MS)质谱;鉴定1或2个低丰度蛋白质:使用电喷雾LC-MS/MS质谱。相关服务:蛋白鉴定
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传统N端Edman测序替代方法一次只能识别一种蛋白质,与质谱法相比灵敏度更低,成本更高。它具有提供N-末端的确定序列的优点,但如果蛋白质在N-末端被阻断,则不能使用(注:超过50%的真核生物蛋白质N末端被阻断)。相关服务:基于Edman降解的蛋白N端序列分析
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• 做蛋白质组学选择MALDI-TOF/TOF还是LC-MS/MS?
如果条带是考马斯染色的,最快和最具成本效益的方法时通过质谱(MS/MS测序)进行蛋白质鉴定,并选择MALDI-TOF/TOF(PMF+MS/MS)质谱和自动数据库分析;如果条带是银染的或可能含有一种以上的蛋白质,灵敏度最高的是利用质谱(通过MS/MS测序)和电喷雾(LC-MS/MS)质谱进行
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因为总离子流的一个峰并不代表一个物质。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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结合保留时间以及质荷比进行寻找。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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这与所检测的物质的性质相关,有些物质容易带正电荷,有些物质容易带负电荷,因此会存在在正离子模式能检测到而负离子模式检测不到的情况。相关服务:蛋白质质谱鉴定
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使用一个新的干净的刀片切出所需的蛋白质带/点。始终戴着手套在干净的玻璃板上切割凝胶。将凝胶片放入新 Eppendorf 管中。即可用于蛋白质鉴定分析。相关服务:蛋白胶点、胶条、IP样品蛋白质鉴定
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角蛋白是一种天然存在的蛋白质,存在于例如头发、死皮、乳胶手套、DTT、缓冲液和羊毛衣物中。通过穿着实验室服和非乳胶手套最大限度地减少角蛋白污染是必不可少的。此外,所有与凝胶接触的东西都应该没有灰尘,例如,用 70% 乙醇清洗。在干净的工作区域(如层流罩)进行凝胶内消化。相关服务:蛋白胶点、胶
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