蛋白分析FAQ汇总

• • 为什么转膜后膜上多处黑点或黑斑？

  是由于抗体与封闭试剂发生了非特异性的结合。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务

• • 为什么WB检测的蛋白质分子量跟理论分子量相比偏低或偏高？

  这是由于凝胶的浓度不适合导致的，高分子的蛋白样品要用低浓度胶；小分子蛋白要用高浓度胶。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务

• • Western blot实验中，选择TBS和PBS缓冲液？

  TBS和PBS缓冲液都可用于WB分析，只是要根据需要选择合适的浓度。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务

• • 做WB实验时可不可以同时加多种一抗？

  通常情况下都是只加一种一抗。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务

• • PVDF和NC膜有何不同？

  PVDF膜价格较贵，可重复使用，结合能力较强。NC膜价格比较便宜，应用较广，结合牢固性较PVDF膜差，韧性也不如PVDF，不能重复使用，但蛋白吸附容量高，亲水性较好。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务

• • WB的一抗用单抗还是多抗好？

  理论上单抗的特异性优于多抗，但是单抗的种类较少而且价格偏高，所以多抗的应用要多一些。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务

• • 运行凝胶时我应该做些什么特殊的事情？

  首先，应该为这个实验补充新鲜的运行缓冲液。大多数实验室使用商业预制凝胶，只要它们没有超过保质期，通常就可以。相关服务:蛋白胶点、胶条、IP样品蛋白质鉴定

• • 我需要多少样本才能获得良好的鉴定？

  一个好的经验法则是使用考马斯亮蓝或银染有一个可见的条带，或至少 10-100 fmol 的蛋白质。在某些情况下，我们常用的蛋白酶（胰蛋白酶）不适合您的蛋白质；对于小蛋白质来说，这更有可能。在这种情况下，将需要更多的蛋白质或可能需要不同的酶。相关服务:蛋白鉴定

• • 我的样本做蛋白质印迹有一个不错的单一条带。这可以测序吗？

  如果您使用典型的凝胶染色剂看不到它，则可能没有足够的蛋白质来鉴定，并确保您切割的正确的条带。此外，WB 只能看到您感兴趣的蛋白质，因此很可能也存在许多干扰蛋白质，通过WB你根本看不到他们。此外，如果您在凝胶上运行全细胞裂解物，印迹它，然后运行蛋白质印迹，即使您使用非蛋白质封闭剂，我们也几乎不

• • 我的样品似乎都是角蛋白。我能做些什么？

  角蛋白通常来自人为污染，几乎可以在样品处理过程的任何时候引入。建筑物内的灰尘通常主要是人体皮肤薄片，因此小心避免灰尘会有所帮助。保持样品盖好、仔细清洁所有接触样品的玻璃器皿和塑料器皿、戴上无粉手套、不要徒手接触样品（或样品溶液）、避免使用公用试剂以及使用专用设备都有助于减少角蛋白污染。相关服