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-糖基化修饰是糖链在糖基转移酶的催化下，与蛋白质侧链氨基酸以糖苷键的形式共价连接，最终形成糖蛋白的过程。研究表明，超过50%的真核生物蛋白在经过糖基化修饰后，最终以糖蛋白的形式参与生命活动而发挥其作用。解析糖蛋白结构是理解其生理功能的一个重要前提。
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• mass spectrometry 质谱法测蛋白质步骤和原理
-质谱（mass spectrometry，MS）法是检测生物体中蛋白质的主流技术之一，其能准确检测生物样品中蛋白质及多肽的相对分子质量、氨基酸序列及翻译后修饰。因其具有高灵敏度、准确性和自动化程度而广泛应用于蛋白质分析领域，质谱法测蛋白质步骤和原理如下所述。
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-蛋白质是一条或者多条肽链以特殊方式组合而成的生物大分子，大多数蛋白质会自然折叠为一个特定的三维结构。蛋白质鉴定主要就是识别蛋白质的一级结构，即鉴定蛋白质肽链氨基酸的排列、分子量，以及二硫键数目和位置。蛋白质鉴定是蛋白质组学的基础，且对生物研究具有重大研究意义。
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-N-糖蛋白是由14个单糖（Glc-3-Man-9-GlcNAc-2）的糖链末端N-乙酰基葡糖胺（GlcNAc）与蛋白质上天冬酰胺（Asn）的酰胺基团以N-糖苷键的形式共价连形成的。共价连接的序列位于CH2结构域的五糖核心区（Fc区）。
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-蛋白质质谱分析中，样本蛋白经过蛋白酶水解后成肽段，经过一维或者多维的色谱法分离，之后肽段被电离和被碎裂形成特征串联质谱谱图，利用自动数据比对程序，将质谱谱图转变成肽段序列。然后对肽段组装和拼接进行验证，将错误的肽段信息滤除，已经被鉴定的肽段序列用来推断样本中有哪些蛋白，当然一些肽段序列可能
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-N-糖基化修饰发生在肽链的天冬酰胺（Asn）上，是最常见的糖基化修饰类型。N-糖结构是由14个单糖的前体链加到Asn残基上形成的，N糖修饰发生修饰的位点是肽链与糖链的结合位点。
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-随着蛋白质糖基化修饰的深入研究，蛋白质N-糖基化（也称作N糖）的检测也越来越广泛。N糖是由14个单糖（Glc-3-Man-9-GlcNAc-2）与蛋白质上天冬酰胺（Asn）的NH2以N-糖苷键的形式共价连接形成。目前，质谱（MS）已成为N糖检测的首选方法，通常使用质谱法对N糖进行检测。
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-液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）就是将色谱的分离能力与质谱的定性功能结合起来，实现对复杂混合物进行更准确的定量和定性分析。通常情况下，同一细胞/组织的蛋白样品，在不同时间/不同环境条件下蛋白谱的表达也存在不同，可通过蛋白LC-MS/MS分析对其进行表征和详细分析。
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-目前运用较广泛的识别和量化复杂蛋白质样品的技术通常是液相色谱（LC）和质谱（MS）技术，液相色谱-质谱联用仪（LC-MS）结合了LC的物理分离能力和MS的质量分析能力，用于样品中蛋白定性定量分析。其中LC技术将多种组分分离，具有高分子特异性和检测灵敏度的MS技术则负责检测分析各组分的结构特
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-N糖对糖蛋白的结构和功能具有重要作用，N糖检测是解析N-糖基化过程及糖蛋白功能的重要前提之一。由于糖蛋白释放的N糖数量有限，N糖分析一直非常具有挑战性，质谱法由于其高灵敏度和选择性而成为N糖检测分析的重要工具。
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