有bluenative page的protocol吗?不知道怎么配胶

以下是BN-PAGE配胶的基本方法，可供您参考。具体条件（如浓度、pH值等）还需要根据您的样品和实验目的进行优化。

 

一、胶液配方

 

1.分离胶（12%）

• 30% 丙烯酰胺溶液：12 mL
• 1.5 M Tris-HCl, pH 8.8：12.5 mL
• 纯水：9.4 mL
• 10% APS：500 µL
• TEMED：50 µL

 

2.浓缩胶（4%）

• 30% 丙烯酰胺溶液：1.33 mL
• 1.0 M Tris-HCl, pH 6.8：2.5 mL
• 纯水：6.07 mL
• 10% APS：100 µL
• TEMED：10 µL

 

二、配胶步骤

• 准备分离胶混合液：按照上述分离胶配方，混合所有成分，最后加入APS和TEMED，混合均匀后立即进行下一步。
• 浇筑分离胶：将分离胶混合液倒入预先清洁并组装好的玻璃板之间，留出足够的空间用于之后浇筑浓缩胶。在分离胶表面加一层无水酒精或纯水以防止氧气抑制聚合反应，等待胶凝固。
• 准备浓缩胶混合液：当分离胶凝固后，去除表面的无水酒精或水，按照上述浓缩胶配方准备浓缩胶混合液，并加入APS和TEMED。
• 浇筑聚集胶：将浓缩胶混合液倒在凝固的分离胶上，立即插入梳子，形成样品孔。
• 凝固和存储：等待浓缩胶完全凝固后，电泳胶即可使用，或用湿纸巾包裹，在4°C下存储备用。

 

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