贵公司怎么处理生物样品的
- 组织、细胞均质化
- 样品净化(去除DNA和RNA,减少s-s键,蛋白质)
- 消除样品中高丰度蛋白质
- 蛋白质提取
- 蛋白质纯化
- 蛋白质浓缩
- 蛋白质水解消化
目前为止,在蛋白质组学研究中还没有制备蛋白质样品的通用方法。准备方案根据样品来源、靶蛋白的物理特性和亚细胞位置、蛋白丰度和基质效应等的差异而不同。
百泰派克生物科技可以根据客户需求免费定制样品制备方法,满足多种不同的需求。我们对样品的处理包括:
对于蛋白质水解,我们也可提供两种水解蛋白质的方法:(1)胶内水解(聚丙烯酰胺凝胶基质中的蛋白质水解);(2)溶液内水解(蛋白质在氯仿/甲醇中沉淀,然后在尿素中再溶解后进行)。工作流程包括:
1. 制备裂解液;
2. 溶液内或凝胶内进行酶切;
3. 使用离液剂(如尿素和胍)使蛋白质变性;
4. 使用DTT还原二硫键;
5. 使用碘乙酸或碘乙酰胺将半胱氨酸烷基化;
6. 去除试剂和交换缓冲液;
7. 在适当的pH和温度下,用胰蛋白酶或其他蛋白酶在碳酸氢铵缓冲液中过夜变性约18小时;
8. 加入酸类物质终止酶切。
9. 蛋白质富集/清洗。
百泰派克生物科技可处理各种类型的样本,包括但不限于:
天然来源的蛋白质;
重组来源的融合蛋白和标记蛋白;
不同亚型的抗体;
膜蛋白及其他。
百泰派克生物科技--生物制品表征,多组学生物质谱检测优质服务商
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