做SUMO内源性的Coip，样品组织放太久了对实验有影响吗？提取蛋白时加了NEM了
- 进行蛋白质浓度测定
- 通过SDS-PAGE分析蛋白质的完整性，观察是否有降解产物。
如果样品组织存放时间过长，尤其是在非最佳条件下（如未适当冷冻或未添加蛋白酶抑制剂），蛋白质可能会发生降解或发生不可逆的改变，导致实验的蛋白质量量和修饰状态不准确。即使在加入了NEM的情况下，这些改变仍可能发生，因为NEM主要是用来抑制蛋白酶的活性，而不是防止所有的蛋白质降解形式。因此，尽管加入NEM有助于保护蛋白质不被泛素化酶和SUMO化酶降解，但它不能完全防止蛋白质在存放过程中可能发生的其他非酶促降解过程。
在实验前，建议您评估一下提取的蛋白质的质量：
如果蛋白浓度合适，SDS-PAGE显示的蛋白条带清晰，没有明显的降解标志，那么您提取的蛋白质样本应该是适合进一步实验的。但是，若有可疑的降解或其他异常，最好准备新鲜的样品以获取最可靠的实验结果。
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