脂质代谢组学研究中，组织提取脂质的办法？

在脂质代谢组学研究中，组织提取脂质的常用方法如下：




1.样品制备：

• 收集组织样本：确保样本新鲜，并迅速将其冷冻以防脂质氧化。
• 称重：精确记录样本的重量，以便后续计算脂质浓度。



2.均质化：

使用均质器（如珠磨机、超声破碎机等）在冷却条件下将组织样本均质化，以释放细胞内的脂质。




3.脂质提取：

Bligh和Dyer方法适用于小样本量。

• 向样品中加入甲醇和氯仿的混合溶剂（比例通常为2:1）。
• 彻底混合后，加入氯仿和水，使最终比例达到1:1:0.9（甲醇:氯仿:水）。
• 离心，收集下层含有脂质的氯仿相。

Folch方法：适用于较大样本量:

• 使用氯仿和甲醇的混合溶剂（比例为2:1）。
• 添加一定量的0.9%盐水。
• 离心后，同样收集下层的氯仿相



4.清洗：

可以通过加入一定比例的盐水，再次离心来清洗，去除上层水相中的非脂质杂质




5.脂质浓缩：

使用旋转蒸发器或氮吹仪在低温下蒸发掉溶剂，留下纯净的脂质。




6.溶剂蒸发：

在氮气下或真空干燥机中蒸发溶剂，留下纯脂质。




7.脂质重悬：

将提取得到的脂质重悬在适当的溶剂中（如氯仿），以备后续分析。




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