DIA怎么做到交替采集?是先全扫描打一级图谱,再将一级全扫描范围分为若干窗口,最后循环对每个窗口所有离子进行选择、碎裂和检测吗?
- 在每个质量窗口,采用较低的碰撞能量进行一级质谱采集,以保留未碎裂的离子。
- 然后增加碰撞能量,对同一窗口内的离子进行碎裂,并采集产生的碎片离子的二级质谱信息。
是的,您对数据独立采集(Data Independent Acquisition, DIA)的基本原理理解得很准确。DIA通常通过以下步骤实现高低碰撞能量的交替采集:
1.全扫描一级质谱图:
首先进行一级质谱的全扫描,以获得样品中所有物质的m/z(质荷比)信息。这一步不涉及碎片化,而是用于记录样品中存在的所有离子的质荷比。
2.划分质量窗口:
然后将整个质量范围划分为若干个窗口(例如每个窗口覆盖一定的m/z范围)。这些窗口通常是连续的,并覆盖整个感兴趣的质量范围。
3.交替采集:
接下来,系统会循环地对每个质量窗口中的所有离子进行选择、碎裂(通过碰撞诱导解离,CID)和检测。
4.数据处理:
收集到的数据包括一级和二级质谱信息,这些信息可以用来鉴定和定量样品中的化合物。
DIA的优势在于它不依赖于特定离子的预先选择,因此可以同时采集大量化合物的信息,包括可能被忽略的或未知的化合物。这使得DIA非常适合复杂样品的全面分析。然而,这种方法也需要复杂的数据处理和分析策略,以从大量的数据中提取有用信息。
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