在LC-MS中建立定量方法时,如何确定定量离子对和定性离子对呢?流动相中哪些添加物能提高电离效率?
在LC-MS中建立定量方法时,确定定量离子对和定性离子对是非常关键的。以下是如何选择它们的一些建议:
1、定量离子对:
通常选择强度最高的离子作为定量离子,因为它提供了最佳的信噪比。在实际操作中,首先需要获取目标化合物的全扫描质谱图谱,然后从中找到最高丰度的且具有代表性的离子。这些离子可以是分子离子(如[M+H]+或[M-H]-)或特征碎片离子。在选择定量离子对时,应确保它们在方法的线性范围内呈现良好的线性关系。
2、定性离子对:
定性离子通常用于验证目标化合物的结构和身份。从全扫描质谱图谱中选择强度较高的、具有结构特征的离子作为定性离子。选择定性离子时,要确保它们与目标化合物的结构和化学性质相关,并且在实际应用中具有足够的选择性和特异性。
在LC-MS分析中,流动相添加物的使用可以提高电离效率。以下是一些常见的添加物:
1、酸性添加物:
在分析阳离子化合物时,可以在流动相中添加酸性添加物,如甲酸(0.1%)或乙酸(0.1%)。这些添加物可以促进阳离子化过程,提高目标化合物的离子产率。
2、碱性添加物:
在分析阴离子化合物时,可以在流动相中添加碱性添加物,如氨水(0.1%)或氨基酸。这些添加物有助于阴离子化过程,从而提高目标化合物的离子产率。
3、盐类添加物:
在某些情况下,可以使用盐类添加物,如醋酸铵或甲酸铵。这些盐类添加物有助于提高分析物的溶解度和电离效率。
请注意,添加物的选择和浓度需要根据实际样品和目标分析物进行优化。在实际应用中,可能需要尝试不同类型和浓度的添加物以获得最佳电离效率。
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