蛋白分析FAQ汇总

• • 请问非变性凝胶电泳可以使互作蛋白复合物分开吗？比如复合物AB跑完胶以后，出现其中一个蛋白A的条带？

  非变性凝胶电泳并非旨在分离互作蛋白复合物，但在某些特定条件下，仍有可能实现复合物AB的分离。 非变性凝胶电泳的主要原理是蛋白质在电场中随电荷和大小而分离。复合物是否能够在非变性凝胶电泳中分离取决于一些因素，如蛋白质间的相互作用强度、复合物的稳定性、蛋白质分子的大小与电荷等。如果蛋白质间的相

• • 蛋白电泳技术去除泪蛋白，靠谱吗？

  蛋白质电泳是一种强大的分析和分离蛋白质混合物的技术。但是，它通常不被用作从生物样品中去除特定蛋白质的方法。 如果你的目标是从样品中去除泪蛋白以进行特定的分析或研究，那么可能需要考虑其他的分离和纯化技术，如亲和层析、超滤或其他类型的层析技术。 百泰派克生物科技--生物制品表征，多组学生物质

• • 请问非变性的蛋白电泳怎么做呀？

  非变性蛋白电泳（Native PAGE，Native Polyacrylamide Gel Electrophoresis）是一种在非变性条件下进行的蛋白质分离技术。非变性蛋白电泳的目的是在保持蛋白质的原有结构和生物活性的情况下，根据蛋白质的电荷、形状和大小进行分离。非变性电泳操作相对简单，

• • 蛋白质分离纯化后常常要脱盐，这些盐从哪里来的？

  蛋白质分离纯化后常常要脱盐，这些盐主要来源于生物体内的各种离子（如钠离子、钾离子、氯离子等）以及实验用到的提取液中的缓冲盐、洗脱液中的盐、某些变性剂的盐成分。高浓度盐可能影响蛋白质的活性、稳定性以及其与其他分子的相互作用，在后续分析方法中，如电泳、质谱、晶体学研究等，产生干扰信号或降低测量准

• • SDS-PAGE里面蛋白质都有相同的荷质比，那么如何实现蛋白质的分离呢？

  当我们说在SDS-PAGE中蛋白质具有相同的荷质比，意思是说蛋白质在SDS的作用下呈线性并带有统一的负电荷。具体来说，每个氨基酸残基上大约绑定了一个SDS分子，使蛋白质在电场中的迁移与其分子量成反比，而不受其原生电荷的影响。 蛋白质的分离是基于它们的分子大小来实现的。在SDS-PAGE中，

• • 蛋白电泳时，为什么经浓缩胶压成一条线后，达到分离胶后会再次变宽？

  在SDS-PAGE电泳过程中，蛋白质样品首先被加载到浓缩胶（或叫堆栈胶）上，然后穿越浓缩胶进入分离胶（或叫分辨胶）。这两种胶的作用和性质都不同： 1.浓缩胶（堆栈胶）： 它的聚丙烯酰胺浓度较低，孔隙大小较大。蛋白在此胶中不是按分子量分离的，而是主要为了使所有的蛋白质集中到一个相对狭窄的区域

• • 蛋白电泳过后，条带蛋白如何分离纯化？

  在SDS-PAGE电泳后，如果你希望从胶块中回收某一特定的蛋白条带，可以通过以下步骤进行纯化： 1.胶片染色和去色： 首先，将整个电泳胶用适当的染料（如考马斯亮蓝）进行染色。 经过一定时间后，用去色液去色，直至所需的蛋白条带清晰可见。 2.切割胶块： 使用干净、锋利的刀片或剪刀，沿着

• • 蛋白质电泳可以分离的最小蛋白的分子量是多少？

  SDS-PAGE的分离能力取决于几个因素，特别是聚丙烯酰胺凝胶的浓度。不同的凝胶浓度对于不同大小的蛋白具有最佳的分辨率。一般来说： 1.低浓度的凝胶（如4%-8%）适用于大蛋白质（>100 kDa）的分离。 2.中等浓度的凝胶（如10%-12%）可以分离中等大小的蛋白质（约25-100

• • 为什么蛋白质电泳要竖直电泳？

  竖直电泳（即在垂直方向上进行的SDS-PAGE）是蛋白质电泳的常用形式，其选择与以下因素有关： 1.分离效率： 竖直电泳提供了良好的分离效率和分辨率。随着蛋白质在凝胶中迁移，它们会在垂直方向上分离，从而使得在短时间内可视化多个不同大小的蛋白。 2.多样品同时加载：

• • 蛋白电泳跑的很歪是什么原因？

  蛋白质电泳时出现的歪曲或斜线通常是由多种因素导致的。以下是一些常见的原因及其可能的解决方案： 1.不均匀的电场： 如果电场在凝胶间不均匀，可能导致蛋白质在凝胶中迁移不均匀。确保电极之间的连接良好，并检查是否有任何破损。 2.凝胶的不均匀性： 如果凝胶制备不均匀或出现气泡，可能导致蛋白的迁