蛋白分析FAQ汇总

• • TCEP IAA作为蛋白还原，烷基化都要用什么浓度呀

  1.TCEP： 常用于还原蛋白质的二硫键。常用浓度为5 mM至10 mM。需要注意的是，TCEP的最终浓度可能根据实验的具体需求和蛋白质的特性有所调整。 2.IAA： 用于烷基化还原后的自由巯基，以防止二硫键的重形成。IAA的常用浓度为15 mM至50 mM。同样，具体浓度可能需要根据实验

• • 蛋白浓度是要在哪一步做？蛋白提取之后就测蛋白浓度，还是在经过还原烷基化之后再测蛋白浓度

  蛋白浓度的测定通常在蛋白提取之后立即进行，即在进行还原、烷基化等后续处理步骤之前。这样做可以确保你了解在后续实验步骤中使用的蛋白质的初始浓度，有助于准确计算和调整所需试剂的量。在进行还原和烷基化处理后，通常不再重新测定蛋白浓度，除非特殊需要。 百泰派克生物科技——生

• • 蛋白质检测用malditof和QE质谱前处理是一样的吗

  MALDI-TOF (Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-Flight) 质谱和 QE (Quadrupole-Orbitrap) 质谱是两种不同的质谱技术，它们在蛋白质检测中的前处理步骤有一些差异。MALD

• • 请问怎么用蛋白质数据库UniProt查找hrp的全部糖肽m/z数据

  要在蛋白质数据库UniProt中查找特定蛋白质（例如hrp）的全部糖肽（glycopeptide）m/z（质荷比）数据，您可以按照以下步骤进行： 1.UniProt网站并搜索蛋白质 访问UniProt官方网站，在搜索栏中搜索“hrp”或该蛋白质的完整名称 2.选择

• • MALDI TOF分子量分析的样本前处理怎么做呀

  进行MALDI-TOF MS分析之前，样本的前处理是一个重要步骤，因为它直接影响到分析的质量和准确性。常见的样本前处理步骤包括： 1.样本纯化： 样品需要高度纯化，以减少杂质的干扰，因为它们可能抑制离子化过程或干扰质谱信号。可以通过离心、凝胶过滤或透析等方法去除杂质。 2.样本浓缩： 如

• • 想在mRNA上用pull down拉甲基化的互作蛋白下来，需要先测序测出哪一段发生了甲基化，再用这一段做pull down吗

  为了在mRNA上用pull-down方法拉甲基化的互作蛋白下来，确实需要首先确定哪一段mRNA发生了甲基化。这是因为mRNA甲基化通常是位点特异性的，即只有特定的核苷酸或区域发生了甲基化。以下是实验步骤概述： 1.mRNA甲基化位点的测序： 使用高通量测序技术（如RNA-Seq）结合特定

• • 测昆虫组织不同发育时间的多肽丰度，提取多肽用普通的蛋白提取液行吗

  在昆虫组织中提取多肽时，可以使用普通的蛋白提取液。这种提取液通常包含了能够破坏细胞膜和细胞器膜的洗涤剂，以及其他一些化合物来保护蛋白质不被降解。然而，需要注意的是，提取液的选择应该根据目标多肽的特性和后续的分析方法来确定。例如，如果需要进行质谱分析，应选择不含有干扰质谱分析的成分的提取液。

• • 蛋白质的序列怎么获取呢？

  蛋白质序列的获取通常通过以下两种主要方法： 1.基因测序和翻译： 首先，通过DNA测序技术获得蛋白质编码基因的序列信息。 然后，通过生物信息学工具将DNA序列转换为相应的蛋白质序列。这是通过翻译DNA中的编码区（exons），按照遗传密码将核苷酸序列转换为氨基酸序列。 2.蛋白质质谱

• • 文献建议100um浓度进行细胞造模，这样的话怎么把5g的鹅去氧胆酸和无血清培养基配置呢

  要配置100µM浓度的鹅去氧胆酸细胞模型，首先需要计算所需鹅去氧胆酸的质量。鹅去氧胆酸的摩尔质量是 M（我们这里需要确切的数值，但以鹅去氧胆酸为例，假设其摩尔质量为408.6 g/mol）。要制备浓度为100 µM的溶液，我们可以使用以下公式： 所需物质的质量 (g)=摩尔浓度 (M)

• • 请问做蛋白质谱需要怎么准备样品呢？

  蛋白质谱分析是一种用于检测和量化蛋白质的方法，在生物医学研究中广泛应用。样品的准备是进行蛋白质谱分析的一个关键步骤，以下是样品准备的一般步骤： 1.样品收集与储存： 首先需要收集蛋白质样品，如细胞、组织或体液等。收集后的样品应立即冷冻储存，以防止蛋白质降解。 2.蛋白质提取： 使用适当的