蛋白分析FAQ汇总
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进行MALDI-TOF MS分析之前,样本的前处理是一个重要步骤,因为它直接影响到分析的质量和准确性。常见的样本前处理步骤包括: 1.样本纯化: 样品需要高度纯化,以减少杂质的干扰,因为它们可能抑制离子化过程或干扰质谱信号。可以通过离心、凝胶过滤或透析等方法去除杂质。 2.样本浓缩: 如
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• 想在mRNA上用pull down拉甲基化的互作蛋白下来,需要先测序测出哪一段发生了甲基化,再用这一段做pull down吗
为了在mRNA上用pull-down方法拉甲基化的互作蛋白下来,确实需要首先确定哪一段mRNA发生了甲基化。这是因为mRNA甲基化通常是位点特异性的,即只有特定的核苷酸或区域发生了甲基化。以下是实验步骤概述: 1.mRNA甲基化位点的测序: 使用高通量测序技术(如RNA-Seq)结合特定
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• 测昆虫组织不同发育时间的多肽丰度,提取多肽用普通的蛋白提取液行吗
在昆虫组织中提取多肽时,可以使用普通的蛋白提取液。这种提取液通常包含了能够破坏细胞膜和细胞器膜的洗涤剂,以及其他一些化合物来保护蛋白质不被降解。然而,需要注意的是,提取液的选择应该根据目标多肽的特性和后续的分析方法来确定。例如,如果需要进行质谱分析,应选择不含有干扰质谱分析的成分的提取液。
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蛋白质序列的获取通常通过以下两种主要方法: 1.基因测序和翻译: 首先,通过DNA测序技术获得蛋白质编码基因的序列信息。 然后,通过生物信息学工具将DNA序列转换为相应的蛋白质序列。这是通过翻译DNA中的编码区(exons),按照遗传密码将核苷酸序列转换为氨基酸序列。 2.蛋白质质谱
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• 文献建议100um浓度进行细胞造模,这样的话怎么把5g的鹅去氧胆酸和无血清培养基配置呢
要配置100µM浓度的鹅去氧胆酸细胞模型,首先需要计算所需鹅去氧胆酸的质量。鹅去氧胆酸的摩尔质量是 M(我们这里需要确切的数值,但以鹅去氧胆酸为例,假设其摩尔质量为408.6 g/mol)。要制备浓度为100 µM的溶液,我们可以使用以下公式: 所需物质的质量 (g)=摩尔浓度 (M)
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蛋白质谱分析是一种用于检测和量化蛋白质的方法,在生物医学研究中广泛应用。样品的准备是进行蛋白质谱分析的一个关键步骤,以下是样品准备的一般步骤: 1.样品收集与储存: 首先需要收集蛋白质样品,如细胞、组织或体液等。收集后的样品应立即冷冻储存,以防止蛋白质降解。 2.蛋白质提取: 使用适当的
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Thermo Fisher Scientific公司的一款特异性SUMO蛋白酶——Ulp,是来自酿酒酵母的ULP1(Ubl特异性蛋白酶1)的重组片段。它对SUMO蛋白融合具有高度特异性,识别SUMO的三级结构而不是氨基酸序列。这种蛋白酶活性高且特异性强,没有非特异性蛋白水解作用,活性温度范围
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质谱分析在食品蛋白质定量测定中的步骤可以大致分为以下几个阶段: 1.样品准备: 首先,需要从食品中提取蛋白质。通常涉及使用缓冲液破坏细胞结构,释放蛋白质,并通过离心等方法去除杂质。 2.蛋白质消化: 提取的蛋白质通常需要经过胰蛋白酶等酶解消化,这样可以将大分子蛋白质分解成较小的肽段,便于
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靶向药物治疗是一种以分子层面上的特定靶点为目标的治疗方式,这些靶点通常是与疾病进程直接相关的特定蛋白质或基因。靶向药物被设计为特异性地结合到病理过程中关键的分子上,如肿瘤细胞的特定蛋白或突变基因。相比传统的化疗药物,靶向药物由于其特异性,通常对正常细胞的影响较小,因此副作用更少。 设计新冠
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• 你有体内sumo化测定的protocol吗?应该是需要特殊的裂解液
体内SUMO化测定技术通常涉及以下几个关键步骤: 1.细胞裂解: 使用一种特殊的裂解液来破坏细胞膜,释放出细胞内的蛋白质。这种裂解液通常含有一些特殊成分,比如蛋白酶抑制剂、磷酸酯酶抑制剂和SUMO特异性蛋白酶抑制剂,以保护SUMO化蛋白质不被降解。 2.蛋白质提取和纯化: 通过离心等方
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