蛋白分析FAQ汇总

• • 变性后的蛋白应怎样保存？可以保存多久？

  在-80℃的条件下保存1-2年没有问题。相关服务:样品制备

• • 同一种抗体可以既用于WB又用于免疫组化吗？

  这要看抗体识别的是那种抗原决定簇（表位），如果该抗体识别的是抗原的线性表位（连续的几个氨基酸），那它可以同时用于两种分析；如果该抗体识别的是构象性表位，则只能用于免疫组化分析。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务

• • 做WB时，为什么要用甲醇浸泡PVDF膜？

  甲醇可以活化PVDF膜上面的正电基团，甲醇浸泡后的PVDF膜可以容易跟带负电的蛋白质结合。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务

• • 同一张PVDF膜上可以检测同一抗体的磷酸化和非磷酸化抗原吗？

  当然可以。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务

• • 分子量大小相差较大的蛋白质可以一起跑凝胶然后转膜吗？

  一般不建议将分子量跨度较大的蛋白同时转膜，可以将蛋白质按分子量分为不同的组别然后分别进行电泳和转膜。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务

• • 细胞裂解液做WB选择蛋白酶抑制剂有什么特殊要求吗？

  一般没有特殊要求，选择广谱的蛋白酶抑制剂就可以。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务

• • PVDF膜和硝酸纤维素膜结合蛋白的原理有什么区别？

  PVDF膜利用正负电荷相互吸引的原理，带正电荷的膜可与负电荷的蛋白相结合；硝酸纤维素膜则通过疏水作用结合蛋白质。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务

• • 如何选择WB内参？

  内参的选择与抗原的分布位置有关，β-actin、GAPDH和Tubulin内参适合分析全细胞蛋白和胞浆蛋白，VCDA1/Porin和COXIV内参适合分析线粒体蛋白。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务

• • 如何避免转膜时凝胶卷曲？

  可在转膜前将凝胶置于转膜缓冲液中浸泡5-10min。相关服务:蛋白质免疫印迹和电转移服务

• • 如何分析圆二色谱数据？

  目前广泛用于分析圆二色光谱数据的两个程序是CDNN34和K2D。首先利用软件分析已知结构的蛋白质，并对每个波长的CD贡献进行加权，从而得到正确二级结构的输出，然后再利用经过验证的软件来分析未知蛋白质的结构。相关服务:蛋白质圆二色谱分析