蛋白分析FAQ汇总

• • 色谱——我可以跑什么样的梯度？

  您可以运行单梯度、双梯度和三梯度。在梯度中，也可以修改流动相有机成分的量、缓冲液的量和缓冲液的pH值。相关服务:蛋白质纯度分析（分子筛/反相色谱）

• • 混合模式色谱的平衡时间是多长？

  如果使用相同的缓冲液，混合模式色谱中的平衡与单模色谱中的相同。如果改变缓冲液的性质，可能需要更长的时间来平衡和/或提高缓冲液的浓度。一旦更换缓冲液，平衡时间与单模色谱法相似。相关服务:蛋白质纯度分析（分子筛/反相色谱）

• • 若化合物呈现共洗脱该如何调整分离的选择性？

  同一色谱柱中可以使用四个参数来调整选择性：有机物量、缓冲液pH值、缓冲液浓度和缓冲液性质。所有这些参数都有助于达到所需的分辨率和保留时间。通常可以选择改变缓冲液pH值和缓冲液浓度来改变化合物的洗脱顺序。相关服务:蛋白质纯度分析（分子筛/反相色谱）

• • 为什么化合物注入混合色谱柱进行分析时没有看到任何峰值？

  确保没有峰值不是由于设备故障造成的，并且使用的特定检测技术可以看到所分析的化合物。一旦消除了设备的潜在问题，就可以考虑修改流动相组成。在大多数情况下，可以增加（或减少）流动相有机成分的数量（在HILIC和RP模式下）以及增加流动相中离子的数量来增加流动相的强度。您还可以调整pH值，以减少带电

• • 如何在反相混合模式色谱中增加/减少流动相的强度？

  对于通过反相机制保留的化合物，增加或减少流动相强度的方法与单模式反相色谱法相同。流动相中更多的有机成分将有助于洗脱，而更少的有机成分可使化合物在色谱柱中停留的时间更长。对于可电离的化合物，则需要考虑以何种模式操作-离子交换还是离子排斥。在离子交换模式下，可以通过增加缓冲液浓度来增加流动相的强

• • 如何改善分析物的峰形？

  混合模式色谱可提供比单模式色谱更好的峰形。如果进行色谱分析时化合物出现变形或峰形不佳，很可能是使用的色谱柱或pH值不当。另一个原因可能是色谱柱过载，这可以通过使用更强的混合模式色谱柱、更弱的流动相或更少进样来改善。相关服务:蛋白质纯度分析（分子筛/反相色谱）

• • 调整流动相的pH值需要多准确？

  建议将pH值保持在0.05 单位内，以确保方法的稳定性和分离的重现性。相关服务:蛋白质纯度分析（分子筛/反相色谱）

• • 你们是否提供天然或重组蛋白或大于3kDa的大肽的分析？

  是的，我们提供多种分析选项，用于分析和表征天然或重组来源的蛋白质，或更大的肽 (>3kDa)。 提供的方法示例如下： 高分辨率SDS-PAGE：测试将显示样品中是否存在天然蛋白质或重组蛋白质或多肽，是否也存在目标质量，以及它是否是单一的纯蛋白质。建议将此测试作为大多数分析方案的起始测

• • LC-MS与LC-MS/MS的区别是什么？

  LC-MS仪器基本上是带有一个质谱检测器的HPLC装置，而LC-MS/MS是带有两个质谱检测器的高效液相色谱装置。相关服务:蛋白质质谱鉴定

• • 变性后的蛋白应怎样保存？可以保存多久？

  在-80℃的条件下保存1-2年没有问题。相关服务:样品制备