蛋白分析FAQ汇总

• • 如何储存SDS-PAGE凝胶？

  通常在每次实验前制备新鲜的SDS-PAGE凝胶。然而，凝胶也可以在4°C的清水中储存约一周。如果凝胶在染色后不能及时拍照，则需要将其置于水中，以防止凝胶干燥和收缩。建议尽快拍摄染色结果。如果凝胶长时间浸泡在水中，条带会分散。相关服务:基于SDS-PAGE的蛋白分离

• • 凝胶是由什么组成的？

  PAGE是丙烯酰胺的聚合物。 双丙烯酰胺作为交联剂，将聚丙烯酰胺链连接起来，这最终形成作为分子网的聚丙烯酰胺链的三维网络。 由于双丙烯酰胺只是连接丙烯酰胺聚合物链的交联剂，因此双丙烯酰胺：丙烯酰胺在凝胶中的比例约为1∶35。相关服务:基于SDS-PAGE的蛋白分离

• • 为什么在凝胶中将蛋白质分子量参照物与蛋白质样品一起运行是有用的？

  用于估计实验样品中多肽的大小。 蛋白质分子量参照物的每个条带对应于单个分子量。通过目视观察实验样品中的多肽与分子量参照物条带相比迁移了多远，可以估计其分子量。 蛋白质分子量参照物的其他次要用途包括：在凝胶电泳期间，视觉确认特定大小的多肽在电泳过程中可能迁移了多远；确认蛋白质在随后的操作（如蛋

• • 电泳后蛋白质凝胶在什么时候不染色？

  虽然有些凝胶在SDS-PAGE之后染色，但有些没有。未染色的凝胶会用于下游分析程序。在这种情况下，可以避免染色凝胶，因为它可能会阻碍后续实验步骤。 一种非常常见的蛋白质分析技术，其中进行了SDS-PAGE但凝胶未染色，而用于其他下游步骤是蛋白质印迹（Western blot）。相关服务:基于

• • 样品可以以凝胶或液体形式提交吗？

  除完整蛋白质分子量测定以外的所有服务，样品可以以凝胶或液体形式提交。 a.用于完整蛋白质分子量分析的样品应为液体形式（即在缓冲液中）。缓冲液不应含有任何洗涤剂。凝胶样品不适合，因为无法有效地从凝胶中提取完整的蛋白质。 b.用于其他服务的凝胶条带应切成约1毫米的立方体。 c.用于所有其他服务的

• • 在提交样品之前，是否可以讨论项目？

  欢迎您随时与我们讨论项目。相关服务:蛋白分析

• • 你们使用哪个数据库搜索引擎进行蛋白质鉴定？

  对于大多数数据，我们使用带有内置 Sequest HT 搜索引擎的 Proteome Discoverer 软件。我们将另外使用 Byonic 来获取磷或糖数据。我们还有 Maxquant 套件。相关服务:蛋白分析

• • 你们接受放射性样品进行分析吗？

  我们不提供任何放射性材料或耗尽的放射性材料的评估。稳定同位素标记的化合物/材料，即碳-13、氘等，可以接受样品提交。相关服务:蛋白分析

• • 需要提交多少样本来进行蛋白质鉴定？代谢组学？脂质组学？

  通常，对于蛋白质鉴定分析，考马斯染色的凝胶条带会相对容易地产生阳性结果。理想情况下，条带中含25-50 ng的蛋白质。对于代谢组学和脂质组学样品，100万个细胞，10-100mg组织，50-200uL血清/血浆和50uL尿液是样品的标称量。相关服务:样品制备

• • 样品可以由客户预处理和分析吗？

  鼓励客户/研究者使用我们提供的预先批准的方法自行处理样品。通常，提前处理的样品允许更快的仪器周转时间，因为提取和其他处理步骤不需要资源和时间。相关服务:蛋白分析