蛋白分析FAQ汇总

• • 我们在精确质谱中看到的那些“额外”峰是什么？

  为了获得准确的精确质量测量，有必要引入参考化合物，与样品同时产生已知质量的峰。“额外”峰来自参考化合物的峰。相关服务:精确质量测定

• • 翻译后修饰的示例有哪些？

  翻译后修饰包括磷酸化、糖基化、泛素化、亚硝基化、甲基化、乙酰化、脂质化和蛋白水解，它们影响正常细胞生物学和发病机制的几乎所有方面。相关服务:翻译后修饰蛋白组分析

• • 甲基化是翻译后修饰吗？

  甲基化是一种重要的蛋白质翻译后修饰，不仅调节靶基因的转录和表达，还控制各种信号通路的活性。相关服务:甲基化定量蛋白组学研究

• • 翻译后修饰的过程是什么？

  翻译后修饰（PTM）是指蛋白质生物合成后的共价修饰和一般的酶促修饰。蛋白质由核糖体将mRNA翻译成多肽链合成，然后经过PTM形成成熟的蛋白质产物。相关服务:翻译后修饰蛋白组分析

• • 最常见的翻译后修饰是什么？

  蛋白质磷酸化是最常被研究的翻译后修饰。据估计，三分之一的哺乳动物蛋白质可能被磷酸化，这种修饰通常在调节蛋白质功能中起关键作用。相关服务:翻译后修饰蛋白组分析

• • 如何识别翻译后修饰？

  检测翻译后修饰的方法有 1.用于检测翻译后修饰的蛋白质印迹（Western Blotting）。 2.用翻译后修饰亲和珠进行免疫沉淀。 3.使用质谱检测翻译后修饰。 4.用于检测翻译后修饰的体外检测。相关服务:翻译后修饰蛋白组分析

• • 离子交换色谱—为什么要选择离子交换色谱（Ion Exchange Chromatography，IEX）？

  离子交换色谱（IEX）根据分子表面净电荷的差异来分离分子。IEX可用于纯化蛋白质、肽、核酸和其他带电生物分子，提供高分辨率和高负载能力的基团分离。IEX可以分离电荷性质只有微小差异的分子种，如两种只有一个带不同电荷氨基酸的蛋白质。相关服务:蛋白质纯度和均一性表征

• • 离子交换色谱—进行蛋白纯化时如何选择强/弱离子交换剂？

  先选择强离子交换剂。如果选择性不够好，尝试使用弱离子交换剂。强离子交换剂（Q、SP和S）在较宽的pH值范围内较稳定，而弱离子交换剂的稳定性（DEAE、ANX和CM）随pH变化。阳离子交换剂和阴离子交换剂都可用于蛋白质纯化，对于某种特定蛋白质来说选择其中一种可能更有效。如果蛋白等电点pI>7，

• • 离子交换色谱—如何选择IEX的缓冲液？

  缓冲离子应具有与IEX介质上的官能团相同的电荷。对于阴离子交换，选择高于等电点（pI）0.5-1个pH单位的缓冲液，因为随着pI的增加，蛋白质会结合得更紧密。对于阳离子交换，选择低于pI0.5-1个pH单位的缓冲液，因为随着pI的降低，蛋白质会结合得更紧密。 若同时进行阴离子和阳离子交换，则

• • hplc—前置峰出现的原因和解决办法？

  a）样品中的干扰。解决方案：使用标准品检查色谱柱性能。b）主峰之前的肩峰或基线逐渐升高可能是另一个样品成分。解决方案：提高效率或改变系统的选择性以提高分辨率。如有必要，尝试其他柱类型。c）柱过载。解决方案：注入较小体积或稀释液（例如1：10 或1：100）的样品。d）样品溶剂与流动相不相容。