代谢组学FAQ汇总

• • 多肽合成—肽储存过程中会发生什么？

  一些典型的降解反应或外消旋化可能包括 Met、Trp、Tyr 或 Cys 的氧化。Asn、Gln 和 C 末端酰胺可能发生脱酰胺作用。可能还会出现天冬酰胺、Asn-Pro分裂、N端Gln形成焦谷氨酰胺以及色氨酸和酪氨酸的二聚体等现象。相关服务:多肽合成

• • 多肽合成—肽溶于水吗？

  常见的非极性、疏水性的氨基酸有：丙氨酸(A)、异亮氨酸(I)、缬氨酸(V)。含有50%及以上疏水或非极性残基的多肽可能不溶于或仅部分溶于水溶液。在这种情况下，首先将疏水肽溶解在 50% (v/v) DMSO、DMF 或乙腈的小体积水中。 然后加入水或缓冲液至所需浓度。相关服务:多肽合成

• • 多肽合成—将合成肽保持在溶液中的最佳方法是什么？

  溶解的肽比冻干的干粉更不稳定。 溶液应在冷冻前分装，以避免解冻-再冷冻循环。由于可能的氧化作用，含有天冬氨酸、谷氨酰胺、半胱氨酸、蛋氨酸、色氨酸、酪氨酸的多肽可能不太稳定。储存的溶液应放在干燥的有机溶剂中，以避免过早水解。PH为5~7的缓冲液对成分的稳定性最好。带细胞培养的多肽(>95%的高

• • 多肽合成—为什么溶解的多肽会失去生物活性？如何防止多肽失去生物活性？

  蛋氨酸的氧化可能是多肽活性丧失的主要原因。亚砜的生成速率与序列有关。最好的方法是用其稳定的同工酶NLE取代蛋氨酸。含有硫基酪氨酸的多肽可能会因为脱硫而失去活性。相关服务:多肽合成

• • 多肽合成—如何溶解含有二硫键的多肽？

  对于含有二硫键的多肽，应避免使用碱性缓冲液。含有游离硫醇基团的多肽在储存过程中可能会氧化形成二聚体或低聚物，即使是在低温下冷冻干燥的干粉也是如此。在中性或微碱性 pH 值下，很容易形成二硫键。二硫键的形成是可逆的， 使用 DTT 可以在碱性条件下还原二硫键。 pH 7-9.5 是 DTT 还

• • 多肽合成—如何溶解含有游离半胱氨酸的肽？

  含有单个游离半胱氨酸的肽将在 pH>7 时被氧化形成二聚体。 这种氧化可以恢复。 含有两个或更多个硫醇部分的肽可在氧化时产生产物混合物。pH 7.5-8 是二硫键形成的最佳条件。 因此，含有游离半胱氨酸的肽最好溶解在脱气溶剂中，例如 缓冲液 pH<7，稀乙酸，0.1% 三氟乙酸的乙腈水溶液。

• • 多肽合成—可以将游离肽或含有游离酸的肽转化为肽酰胺吗？

  不能，一旦合成肽，C-末端羧基就不能转化为甲酰胺。 肽酰胺必须以不同的方法合成和裂解。相关服务:多肽合成

• • 多肽合成—合成的肽如何纯化？纯度如何？

  通过SPPS获得的肽通常通过 RP-HPLC 纯化。大多数肽的 HPLC 纯度为 95% 或以上。对于含有游离 Cys、N 端 Gln 或硫酸化肽的肽，可能会出现较低的纯度。 通过优化合成和纯化方法可以提高纯度。相关服务:多肽合成

• • 多肽合成—您可以合成小肽吗？

  二肽、三肽和其他短肽通常在称为液相合成的溶液中合成。相关服务:多肽合成

• • 代谢组学——代谢组学分析需要多少样本？

  所需材料的最低量：细胞培养物：200万个细胞；微生物颗粒：50 mg；组织：50 mg；生物流体（血浆/血清和尿液）：50 μL；纯蛋白质（蛋白质-代谢物/脂质相互作用研究）：10 μg。相关服务:代谢组学