代谢组学FAQ汇总

• • 多肽合成—什么是MAP？

  MAPS 或多抗原肽是一种支链肽，其中线性肽链通过多聚赖氨酸核心在其 C 端连接，从而增加整个分子的大小。这样做是为了消除肽与 KLH 的偶联。然而，MAP上肽的构象似乎不太灵活，通过 MAP 获得的抗体通常比通过常规 KLH 偶联获得的抗体识别靶蛋白的频率更低。此外，制作 MAPS 时不会

• • 多肽合成—为什么我的 KLH 偶联肽溶液出现浑浊？

  KLH 或 Keyhole Limpet Hemocyanin 是一种大型聚集蛋白 (MW = 4×10 5-1×10 7)。 由于其大小和结构，其在水中的溶解度有限，导致外观浑浊。 不影响免疫原性，混浊液可用于免疫分析。相关服务:多肽合成

• • 多肽合成—粗肽和脱盐肽的纯度是多少？ 如何纯化肽？ 杂质是什么？

  对于15aa以下正常序列的短肽，粗品级的HPLC浓度一般为40-60%；脱盐级的HPLC浓度一般为50-70%。肽越长，粗品或脱盐的纯度越低。肽通常通过 HPLC 使用水和乙腈梯度进行纯化。大多数杂质是片段或缺失肽、不完全去保护的肽以及残留的盐和水。相关服务:多肽合成

• • 多肽合成—研究级定制肽的批次间一致性如何？

  研究级定制肽的质量控制有限（仅限 MS 和 HPLC 分析）。 因此，在所需的肽含量、盐含量、水含量、杂质、溶解度等方面，批次之间的差异是预期的。但这种批次之间的差异不会对大多数实验造成问题。但是，如果您从事敏感的生物测定，并且希望最大限度地减少批次间的差异，您应该要求额外的质量控制和分析（

• • 多肽合成—如何确定净肽重量、净肽浓度或净肽摩尔质量？

  默认情况下，研究级多肽根据冻干粉的总重量发货，仅附带 MS 和 HPLC 数据。冻干肽粉末包括杂质如片段肽、盐和残留水。冻干肽可含有高达 70% 重量的水和盐。与疏水肽相比，更亲水的肽通常含有更多的结合水和盐。“肽含量分析”通常用于确定净肽含量、净肽浓度或净肽摩尔：肽净重（所需肽的重量）=

• • 多肽合成—净肽重量和总肽重量有什么区别？

  合成的冻干肽粉通常不仅含有肽，还含有一些其他物质，如水、吸收的溶剂、抗衡离子和盐。总肽重量是指该混合物的重量。净肽重量表示样品中肽组分的实际重量。净肽含量通常为总肽重量的50-80%，通常通过氨基酸分析或Nirtongen分析测定。净肽含量不应与纯度混淆。纯度定义了样品肽组分中目标肽序列的百

• • 多肽合成—SPPS 中的 Fmoc 策略是什么？

  SPPS是基于固体支持物合成的肽，也称为树脂，在树脂上修饰接头以提供第一个氨基酸的反应基团。肽是在预活化或原位活化条件下，通过酰胺基和羧基之间的酰胺键从另一个肽合成的。为了避免不希望发生的反应，保护基团被用来暂时掩蔽氨基酸的Nα位和侧链上的反应性基团。Fmoc是常用的N-α位保护基团之一，其

• • 多肽合成—肽从什么方向合成？

  肽从序列的C末端合成到N末端。相关服务:多肽合成

• • 多肽合成—是否能在N端用Q合成肽？

  肽N端的Q在酸性条件下（如纯化和冻干）不稳定，可能发生环合反应形成pGlu。为避免副反应，建议进行N末端乙酰化。相关服务:多肽合成

• • 多肽合成—粗品代表的纯度百分比是多少？

  粗品是指纯度为<70%的肽，MS报告中可以找到目标肽，但很难提供确切的纯度。相关服务:多肽合成