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一、MRM是什么?
MRM(Multiple Reaction Monitoring)是质谱技术中的一种定量分析方法,也称为多反应监测。它通过选择特定的前体离子和产物离子对,实现对目标分子的高灵敏度和高选择性的定量分析。
二、MRM的原理是什么?
MRM基于质谱仪的三重四极杆(triple quadrupole)结构。在MRM模式下,首先通过Q1(第一四极杆)选择特定的前体离子,然后通过碰撞诱导解离(CID)使前体离子产生产物离子,最后通过Q3(第三四极杆)选择特定的产物离子进行检测。
三、MRM的优势是什么?
1.高选择性:
通过选择特定的前体离子和产物离子对,可以排除其他干扰物质的影响,提高分析的选择性。
2.高灵敏度:
由于MRM只监测特定的前体离子和产物离子对,可以减少背景噪声的干扰,从而提高灵敏度。
3.高定量准确性:
MRM可以通过内标法进行定量,内标物质的加入可以校正样品中的变异性和分析过程中的误差,提高定量准确性。
四、MRM在生物药物领域的应用有哪些?
1.药物代谢研究:
MRM可以用于药物代谢物的定量分析,了解药物在体内的代谢过程和代谢产物的生成情况。
2.药物药代动力学研究:
MRM可以用于药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄(ADME)过程的定量分析,评估药物的药代动力学特性。
3.蛋白质定量研究:
MRM可以用于蛋白质的定量分析,例如药物靶标蛋白的定量研究,了解药物与靶标蛋白的相互作用情况。
五、MRM的实验步骤是什么?
1.选择前体离子和产物离子对:
根据目标分子的质荷比和碎裂规律,选择适当的前体离子和产物离子对。
2.优化碰撞能量:
通过调整碰撞能量,使前体离子产生产物离子的丰度最大化。
3.确定定量离子对:
选择适当的前体离子和产物离子对进行定量分析。
4.建立标准曲线:
通过制备一系列浓度已知的标准品,建立标准曲线,用于定量目标分子。
5.样品制备和分析:
根据样品的特性,选择适当的样品制备方法,如提取、纯化等,然后进行质谱分析。
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