SDS-PAGE检测目的蛋白质,电泳结果如何?
SDS-PAGE(Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis)是一种常用的蛋白质电泳技术。其基本原理是使用 SDS(十二烷基硫酸钠)使蛋白质线性化并赋予负电荷,然后在聚丙烯酰胺凝胶中进行电泳。由于 SDS 的存在,蛋白质的迁移速度主要取决于其分子量,而与其原有的电荷和形状无关。
1.如何解读 SDS-PAGE 电泳结果?
SDS-PAGE 电泳后,你会得到一个带有多条蛋白质带的凝胶。每条带代表一种蛋白质,带的位置(即迁移距离)反映了蛋白质的分子量。带的宽度和深度则反映了蛋白质的丰度。通常,分子量大的蛋白质迁移距离短,分子量小的蛋白质迁移距离长。通过与已知分子量的标准蛋白质进行比较,可以估计目的蛋白质的分子量。
2.如何确定目的蛋白质?
如果你知道目的蛋白质的预期分子量,你可以通过查找与预期分子量相符的蛋白质带来确定目的蛋白质。如果你有目的蛋白质的特异性抗体,你还可以进行免疫印迹(Western blot)分析来确证目的蛋白质的存在。
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