紫外吸收法测定蛋白质浓度的基本原理是什么?
- 是吸光度。
- 是摩尔吸光系数,表示特定波长下,特定物质每摩尔吸收的光量。
- 是物质的浓度(摩尔/升)。
- 是光通过的样品的长度(通常是1厘米)。
紫外吸收法测定蛋白质浓度的基本原理是:蛋白质分子中的芳香氨基酸残基(主要是色氨酸和酪氨酸)和一些其他的结构元素可以吸收紫外光(特别是在280nm附近的波长)。当紫外光通过含有蛋白质的溶液时,蛋白质分子会吸收部分紫外光。通过测量溶液的吸光度(Absorbance,A),可以评估蛋白质的浓度。根据比尔定律(Beer-Lambert定律),吸光度与蛋白质的浓度成正比。
具体来说,比尔定律描述为: 其中:
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