免疫共沉淀 Co-IP 实验原理是什么?
免疫共沉淀(Co-IP)是一个用于检测两种或多种蛋白质之间在细胞内是否存在物理互作的技术。其原理是基于抗体的特异性结合能力,利用抗体与目标蛋白质结合形成免疫复合物,然后通过沉淀技术将免疫复合物与其它相互作用的蛋白质一起沉淀下来,从而实现对目标蛋白质与其相互作用蛋白质的检测:
特异性抗体与目标蛋白质的结合:实验中使用的特异性抗体能够识别并结合到目标蛋白质上。这个目标蛋白质可能与其他蛋白质形成复合物。
1.沉淀蛋白质复合物:
当抗体结合到目标蛋白质上后,我们可以使用A/G蛋白质磁珠或A/G琼脂糖珠等配体来沉淀整个蛋白质复合物。A/G蛋白质磁珠或A/G琼脂糖珠可以与抗体的Fc区域特异性结合,因此,当这些珠子结合到抗体时,它们也会沉淀抗体所结合的目标蛋白质及其与之相互作用的所有蛋白质。
2.检测蛋白质相互作用:
一旦将蛋白质复合物沉淀下来,就可以使用各种方法(例如西方印迹)来检测沉淀物中的蛋白质,并验证是否有其他蛋白质与目标蛋白质相互作用。如果在沉淀物中检测到了与目标蛋白质相互作用的蛋白质,那么就可以确认这两种蛋白质在细胞内存在物理互作。
百泰派克生物科技——生物制品表征,多组学生物质谱检测优质服务商
相关服务:
How to order?