大鼠细胞自由巯基定量
- 色谱法：利用高效液相色谱（HPLC）配合荧光探针，可以准确测量细胞内GSH的浓度。
- 电化学法：通过电化学传感器直接测定细胞样本中的巯基含量，这种方法响应快速且灵敏度高。
- Ellman法：使用特定的反应试剂（如5,5'-二硫基二硝基苯酚，DTNB），能够与巯基反应生成黄色化合物，其吸收光谱可以被测定用来估算巯基的浓度。
自由巯基，主要指含有巯基（-SH）的生物分子，在细胞中以谷胱甘肽（GSH）的形式存在。GSH是细胞内最丰富的抗氧化剂之一，它能够清除有害的氧化剂并维持细胞内的氧化还原平衡。自由巯基的异常，如其浓度的减少，常常与多种疾病的发展相关，包括癌症、神经退行性疾病及心血管疾病。在实验动物模型中，特别是大鼠模型中，自由巯基的定量分析可以用于评估药物的毒性影响，监测疾病的进展，以及研究抗氧化治疗的效果。例如，在研究某种新的抗癌药物时，科学家可以通过测定大鼠肿瘤细胞中的GSH水平，来评估药物的氧化应激反应。
自由巯基的测定方法
在大鼠细胞中，自由巯基的测定通常采用以下几种技术：
Ellman法是检测自由巯基浓度的常规方法，原理为DTNB试剂与游离巯基反应生成2-硝基-5-硫代苯甲酸（TNB-），若在中性或碱性pH条件下的水中可以离子化，生成TNB2-二价阴离子。这种TNB2-离子呈现黄色，通过测定在412nm可见光吸光度就可以定量TNB2-，然后可以用半胱氨酸标准品定量巯基或者基于摩尔吸收率定量巯基的方法对自由巯基进行定量。
百泰派克生物科技BTP基于CNAS/ISO9001双重质量认证体系建立七大检测平台，其中基于Ellman法的自由巯基含量检测平台，通过CNAS认证，具有完整的方法学开发和转让能力。
【技术优势】
1.高灵敏度：
能够检测到极低浓度的自由巯基，适合研究自由巯基在细胞内的微小变化。
2.高选择性：
通过选择性的探针和分离条件，可以特异性地定量特定类型的自由巯基，避免了其他物质的干扰。
3.实时监测：
特别是荧光探针技术，可以在不破坏细胞的条件下实时监测细胞内自由巯基的动态变化。
4.广泛的应用范围：
适用于各种生物样品，包括细胞培养、组织切片和动物模型等。
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