大肠杆菌O糖基化位点分析
- N-聚糖通过 PNGase F 释放并从溶液中去除。
- 使用酶来消化蛋白质。
- O-糖肽通过β-消除作用释放。
- 使用 HILIC(亲水相互作用液相色谱)富集 O-糖肽。
- 使用 LC-ESI-MS/MS 测定 O-连接糖基化位点占用率。
- 消化:蛋白质在还原和烷基化后用蛋白酶(通常是胰蛋白酶)消化。此外,我们还会使用多种蛋白酶进行酶消化,从而增加 O-聚糖位点的覆盖范围。
- 富集:分别用 Amide-80、MAX 或 SAX SPE 进行富集。
- 检测:糖肽通过 LC-MS/MS 直接分析。
在当今生物科学研究中,对蛋白质翻译后修饰的深入理解,尤其是糖基化修饰,对揭示蛋白质功能、细胞信号传导、病原体识别以及疾病发生机制至关重要。O-糖基化,作为一种常见的翻译后修饰方式,涉及添加到蛋白质丝氨酸或苏氨酸残基上的单糖或多糖链。在大肠杆菌等微生物中,O-糖基化对其生物学功能、病原性以及与宿主之间的相互作用起着决定性作用。
图1. O-糖基化位点分析
在微生物学和生物技术领域,对细菌表面糖基化修饰的研究是理解细菌生理和病理机制的关键。大肠杆菌(Escherichia coli)作为一种广泛研究的模型微生物,其表面的O糖基化(O-antigen glycosylation)位点分析为科研人员提供了理解细菌与宿主相互作用、病原性及免疫逃避机制的重要窗口。百泰派克生物科技(BTP)在这一领域内采用先进的生物技术和分析平台,为大肠杆菌的O-糖基化位点分析提供专业的服务。通过我们的分析,研究者可以精确地鉴定大肠杆菌蛋白质的O-糖基化修饰位点,深入理解其生物功能和在宿主相互作用中的角色。
百泰派克生物科技提供以下O-糖基化位点分析服务,包括:
1. 聚糖分析
2.自下而上的方法
技术优势:
1.高精度的位点鉴定
采用高分辨率质谱技术,结合专门的酶解和富集策略,我们能够高精度地鉴定O-糖基化位点,即使是低丰度的修饰也不会错过。
2.广泛的覆盖范围:
我们的技术不仅能够分析已知的O-糖基化位点,还能够发现新的修饰位点,为大肠杆菌的蛋白质功能研究提供全新的视角。
3.深入的功能分析:
除了O-糖基化位点的鉴定,我们还提供修饰位点的定量分析、蛋白质-蛋白质相互作用分析以及修饰对蛋白质结构和功能影响的评估,帮助客户从多个维度理解O-糖基化的生物学意义。
4.定制化的解决方案:
根据客户的具体研究需求,我们可以提供从样品准备到数据分析的定制化服务,确保结果准确、可靠且具有生物学意义。
百泰派克生物科技的O-糖基化位点分析服务是基于对生物学深刻理解和先进技术的应用,旨在为客户提供准确、全面的分析结果。我们热诚欢迎全球的科学家和研究者与我们合作,欢迎免费咨询。
百泰派克生物科技--生物制品表征,多组学生物质谱检测优质服务商
相关服务:
How to order?