蛋白质定量测定原理

蛋白质定量测定是生物医学研究中的一项基本技术，主要用于评估样品中蛋白质的浓度。蛋白质定量的方法多种多样，其中最常用的有布拉德福德法（Bradford）、Lowry法、比氏法（Biuret）和UV吸收光谱法等。这些方法各有其特点和适用范围，但是都基于蛋白质与某些试剂发生化学反应，产生色谱或产生一定的光谱吸收特性，然后通过比较未知样品与已知浓度的标准曲线，从而推算出样品中蛋白质的浓度。

以下是对这几种蛋白质定量方法的简单介绍：

1.布拉德福德法：

布拉德福德法是一种常用的蛋白质定量方法，其原理是布拉德福德试剂中的考马斯亮蓝G-250与蛋白质中的酸性和中性氨基酸发生配位共价结合，导致考马斯亮蓝G-250的最大吸收波长从465nm转移到595nm，从而使溶液呈蓝色。

2.Lowry法：

Lowry法是另一种常用的蛋白质定量方法，其原理是蛋白质的肽键与酚和铜离子反应，产生蓝色染色，然后在750nm处测量其吸光度。

3.比氏法：

比氏法的原理是蛋白质的肽键与铜离子在碱性条件下形成紫色络合物，然后在540nm处测量其吸光度。

4.UV吸收光谱法：

UV吸收光谱法则是利用蛋白质（主要是芳香族氨基酸）在280nm处具有吸光特性，通过测量其吸光度来推算蛋白质的浓度。

这四种方法在应用过程中需要考虑实验条件、样品性质等多种因素，以确定最适合的蛋白质定量方法。

百泰派克生物科技--生物制品表征，多组学生物质谱检测优质服务商

相关服务：