TMT定量原理
TMT技术是采用同位素试剂标记的方法,使用同位素标签标记蛋白酶解后产生的多肽,之后通过串联质谱检测,针对两个或多个蛋白样本展开相对定量分析。其中,TMT同位素标签化学结构由质量报告基团(Mass Reporter)、氨基反应基团(Amine-reactive Group)和质量平衡基团(Mass Normalizer)三个部分组成。
在TMT检测过程中,氨基反应基团可以和样本中蛋白肽段的N末端或末端赖氨酸侧链基团的游离氨基共价结合,从而使肽段成功标记上TMT标签后进入质谱检测。在串联质谱检测中,由于不同TMT标签有不同质量的报告基团,一级质谱检测可通过质量平衡基团使不同样本的同一肽段具有相同的质荷比(m/z)。相同质荷比肽段进入二级质谱后,由于肽段中质量报告基团碎裂而被释放,在质谱低质量区产生报告离子峰,通过质谱检测不同报告基团的离子信号即可获得不同样本间相同肽段的的定量信息。
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合nanoLC-MS/MS纳升色谱技术,提供基于TMT的蛋白质组学分析服务。Obitrap Fusion Lumos质谱仪是现在分辨率和灵敏度最高的质谱仪,保证了低丰度肽段碎裂片段鉴定的灵敏度;同时在肽段碎裂过程中采取HCD与ETD结合的模式,保证肽段碎裂片段的完整性。您只需将样品寄出并将实验目的告诉我们,我们会负责项目后续所有事宜。
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