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De Novo测序,指的是在缺乏任何数据库参考的前提下,通过高分辨率质谱仪采集到的MS/MS碎片离子数据,直接从蛋白质推断出氨基酸序列。这一技术的关键在于将蛋白酶解为大量可覆盖全序列的短肽段,通过算法解析这些片段的碎片谱图,并在之后进行序列拼接,从而获得抗体轻链与重链的全长序列。与依赖数据库
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在蛋白质组学、临床样本分析、非模式生物研究等领域,科研人员越来越常遇到一种情况:从质谱数据中检测到的蛋白质肽段,在任何数据库中都找不到匹配。这些被称为“未知蛋白”或“orphan peptides”的分子,可能是: 来自未注释的新蛋白 新发现的剪切变体 病原体、肿瘤细胞或外源表达产物 翻译
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引言:蛋白质药物的“序列盲区”问题 随着生物制药技术的迅猛发展,蛋白质类药物(如单克隆抗体、融合蛋白、重组酶等)已成为新药研发的主力军。然而,在仿制药开发、质量一致性验证、专利规避设计、以及老药回溯等环节中,获取蛋白质药物的完整序列信息成为一项基础而又关键的任务。传统的测序方式大多依赖参考基
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一、什么是De Novo测序? De Novo测序(From Scratch Sequencing) 是一种不依赖任何已知参考序列或数据库,直接从实验数据中推断出生物大分子(如蛋白、DNA或RNA)序列的方法。在蛋白质组学中,它指的是:利用高分辨率质谱仪采集酶解多肽的MS/MS碎片数据,通过
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De Novo测序是指在没有任何已知序列信息或参考数据库的情况下,通过实验数据直接推断出一段生物分子(如DNA、RNA、蛋白质)的原始一级结构的技术。它是研究全新物种、新突变体、未知抗体、天然蛋白等生物样本时的关键方法。在蛋白质组学领域,De Novo测序是利用高分辨率质谱(MS/MS)对酶
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不同的研究目标与样本类型,对测序方法的要求截然不同。尤其是在蛋白质组学或抗体解析等应用场景中,很多研究者在“De Novo测序”和“基于参考数据库测序”之间感到疑惑:两者有何本质区别?什么情况下必须用De Novo?又是什么让它成为当前蛋白结构解析中的关键技术?本文将从原理差异、应用场景、优
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为什么要对单克隆抗体进行De Novo测序? 在抗体药开发与研究中,获取全长抗体氨基酸序列是基础起点。然而,在以下情境中,常规的基因测序路径难以奏效:1、抗体仅有纯化蛋白,无法获得B细胞或mRNA;2、抗体来自外部渠道、文献报道或商业来源,缺乏原始序列信息;3、早期研发阶段或体内筛选出的克隆
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在蛋白质功能注释、结构预测和进化分析等多个生物学研究领域中,蛋白质序列比对与同源性分析已成为信息获取与假设生成的关键步骤。通过对氨基酸序列的比较,可以快速推测未知蛋白的功能、识别保守结构域、追踪蛋白家族的演化轨迹。背后的核心逻辑是基于“结构和功能的保守性往往体现在序列的保守性上”。蛋白质序列
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什么是De Novo单克隆抗体测序? De Novo抗体测序是指不依赖参考数据库,通过高分辨率质谱(LC-MS/MS)对酶解抗体肽段进行MS/MS碎片分析,利用算法从碎片峰图中逐步推断氨基酸序列,并拼接出完整的单克隆抗体序列的技术。 与传统的数据库比对型测序不同,De Novo测序不需要
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在蛋白质组学中,质谱(MS)是核心分析技术,而其分析结果高度依赖于样品的质量。无论是全蛋白组分析、修饰组学、还是靶向蛋白定量,都必须以高质量的样品制备为前提。本文将系统解析蛋白质测序的样品制备流程,涵盖不同样本类型的预处理策略、蛋白提取、酶解、纯化与质控标准,并介绍百泰派克生物科技在这一环
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