bs3交联的步骤?
BS3交联的步骤通常包括以下几个关键环节:
1.样品准备:
首先准备好要交联的蛋白质样品。确保蛋白质浓度适宜,并且样品处于合适的缓冲液中。
2.BS3溶液配置:
将BS3溶解在适当的溶剂中(例如DMSO或水),以达到所需的浓度。
3.加入BS3至样品:
将BS3溶液加入到蛋白质样品中,轻轻混合以确保均匀。BS3的添加量取决于蛋白质的浓度和所期望的交联程度。
4.孵育:
将混合物在室温下孵育一定时间,通常为30分钟到数小时。这一步骤允许BS3与蛋白质中的氨基酸残基反应形成交联。
5.终止反应:
使用适当的方法(如添加Tris或糖)来终止交联反应。这通常在反应完成后立即进行。
6.后处理
可能包括洗涤、离心和去除未反应的BS3,以纯化交联的蛋白质。
7.分析:
使用适当的生物化学和分子生物学方法(如SDS-PAGE,Western blot,质谱分析等)来分析交联的蛋白质样品。
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