用GST融合蛋白转染进293T细胞，将细胞用裂解液裂解。用谷胱甘肽琼脂糖珠纯化，洗脱后用western blot分析可以吗？
你描述的GST pull-down实验的方法是可行的，具体步骤包括：利用GST融合蛋白转染293T细胞，通过裂解液裂解细胞，利用谷胱甘肽琼脂糖珠纯化GST融合蛋白以及可能与其相互作用的蛋白，然后用Western blot方法进行分析。详细的步骤如下：
1.转染293T细胞：
通过将带有GST标签的目标蛋白的质粒DNA转染到293T细胞中。
2.裂解细胞：
转染后的细胞用含有对蛋白酶抑制剂的裂解液裂解，以把细胞内的蛋白释放出来。
3.纯化GST融合蛋白：
利用谷胱甘肽琼脂糖珠可以将GST融合蛋白从裂解液中纯化出来，此过程也可能将与GST融合蛋白有相互作用的蛋白一并纯化出来。
4.洗脱：
使用含有谷胱甘肽的溶液洗脱与珠子结合的GST融合蛋白以及可能的相互作用蛋白。
5.Western blot：
通过Western blot方法对纯化后的样品进行检测，既可以检测GST融合蛋白，也可以通过特定的抗体检测可能的相互作用蛋白。
需要注意的是，一些具体的实验条件可能需要根据你的目标蛋白和预期的相互作用蛋白来进行优化，例如裂解液的组成、洗脱缓冲液的谷胱甘肽浓度、以及Western blot的抗体等。
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