PEG通过click反应连接了一个多肽，打maldi-tof的时候发现分子量对不上，像是PEG与多肽之间断开了，这是什么原因呢？

在你的实验中，PEG通过Click化学连接多肽，但在MALDI-TOF检测时发现分子量异常，怀疑是PEG与多肽之间发生了断裂。以下是可能的原因及解决方案：

可能原因：

1. 连接键问题：如果PEG和多肽之间的化学键不够稳定（如酯键或亚胺键），可能在MALDI激光下断裂。
2. MALDI激光能量过高：激光可能导致PEG或多肽链断裂，特别是PEG中的醚键易受高能量影响。
3. 样品中残留金属离子：Click反应后的铜离子残留可能在检测中引发分子不稳定。
4. 基质选择不当：部分基质可能加剧样品分子的断裂或影响大分子检测。

 

建议解决方案：

1. 优化连接键：选择更稳定的化学键（如酰胺键或三唑键）来连接PEG和多肽。
2. 优化MALDI条件：降低激光强度，或改用温和的基质（如CHCA）。
3. 去除金属离子：通过螯合剂（如EDTA）彻底清除反应中的铜离子。
4. 尝试ESI-MS：如果MALDI问题无法解决，可改用ESI-MS，避免激光引起的分子断裂。

 

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