请问DSS交联后跑胶的步骤是什么？需要用非变性的胶和loading吗?

DSS交联后的蛋白质跑胶的步骤主要包括以下几个部分：

 

1、样品制备

用DSS交联后，用去离子水或PBS缓冲液对样品进行清洗，以去除未反应的DSS。根据实验需要，使用非变性的聚丙烯酰胺（PAGE）凝胶进行电泳。在准备样品时，可以将样品与上样缓冲液（loading buffer）混合，以确保样品的适当浓度和上样条件。上样缓冲液通常含有甘油和染料，有助于样品在胶中的沉降和跟踪。

 

2、电泳分离

然后将样品加载到PAGE上进行电泳分离。一般情况下，跑10-20%的聚丙烯酰胺凝胶电泳可以更好地区分交联的蛋白质。

 

3、染色和脱色

最后，通过湿式转印将蛋白质转移到PVDF膜上，然后可以通过染色（如考马斯亮蓝或银染）来可视化转印的蛋白质。如果要进行免疫印迹（Western blot），则需用特定的抗体进行检测，之后再进行二抗结合及显色步骤。

 

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