蛋白质序列分析

    蛋白质序列分析是指对构成蛋白质一级结构的氨基酸残基进行鉴定,以及对氨基酸残基的排列顺序进行分析,常用的蛋白质序列分析方法主要包括质谱法和非质谱法(Edman降解法)两类。

     

    质谱法是目前使用最为广泛的一种蛋白质序列分析方法,基于质谱的蛋白质序列分析结合对应算法和生物信息学技术,可以实现蛋白的N/C末端序列分析、全序列分析和从头测序分析,其可用于已知蛋白的表达验证和未知蛋白的氨基酸序列分析。基于质谱的蛋白序列分析通过特异性蛋白酶将目标蛋白酶切为肽段,再经过MS/MS或LC-MS/MS检测得到肽段二级质谱图,解析谱图获得肽段的氨基酸序列,最后根据肽段间的重合互补性完成各肽段的拼接,由此可实现完整蛋白质的序列分析。

     

    百泰派克使用Thermo公司推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪提供蛋白测序服务,该服务可对蛋白样品的序列分析。Obitrap Fusion Lumos质谱仪是现在分辨率和灵敏度最高的质谱仪,保证了低丰度肽段碎裂片段鉴定的灵敏度;同时在肽段碎裂过程中采取HCD与ETD结合的模式,保证肽段碎裂片段的完整性。可以实现蛋白样品的N端,C端序列分析以及蛋白全长序列分析。

     

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