TMT和iTRAQ技术原理

iTRAQ（Isobaric Tag for Relative Absolute Quantitation）和TMT（Tandem Mass Tags）技术是分别由美国AB Sciex公司和Thermo公司研发的多肽体外标记定量技术，是基于体外等质量同位素标记的相对或绝对定量技术。其使用多种不同的等质量同位素试剂作为标签，同时标记多种不同蛋白质样品并将其混合为一体进行检测。

这些等质量同位素标签试剂由3个不同的化学标签组成：报告部分、肽反应部分和平衡部分。报告部分根据实验设计选择标记个数，形成2-18种等质量同位素标签。肽反应部分是肽反应基团将iTRAQ/TMT标签与肽段氨基端（N-末端及赖氨酸侧链残基）连接标记酶解肽段。平衡部分则保证了iTRAQ/TMT试剂标记的不同样品中的相同肽段具有相同的质荷比（m/z）。在串联质谱（MS/MS）中，一级质谱（MS1）检测到的不同iTRAQ/TMT试剂标记的同一肽段分子量完全相同，使标记的多肽是无法彼此区分出来。然而，在二级质谱（MS2）检测中，iTRAQ/TMT标记的平衡基团在二级质谱（MS2）检测中脱离，使信号离子呈现出不同m/z谱峰，根据二级质谱中波峰高度和面积即可对蛋白质进行定量分析。

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF质谱平台，Orbitrap Fusion质谱平台，Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供TMT/iTRAQ定量蛋白组学分析服务，您只需要将实验目的告诉我们将样品寄出，我们会负责项目后续所有事宜，包括细胞培养、细胞标记、蛋白提取、蛋白酶切、肽段分离、质谱分析、质谱原始数据分析、生物信息学分析。