串联质谱法测肽段序列原理

肽段测序是对肽段一级结构的氨基酸种类和排序进行检测分析，通常可使用串联质谱法测定肽段序列。串联质谱可直接用于测定肽段的氨基酸序列，其原理是利用肽段在离子化过程产生亚稳定离子，通过分析相邻同组类型峰的质量差来识别相应的氨基酸残基。

串联质谱法测肽段序列是从一级质谱检测肽段母离子，采集质量峰值较高的肽段母离子进入二级质谱检测。肽段母离子进入二级质谱后经惰性气体碰撞碎裂，肽段断裂产生碎片离子信号，通过检测肽段碎片离子信号即可获得肽段二级质谱图。解析质谱图并根据各肽段质量数差值推导出肽段氨基酸序列，经过肽段之间的拼接可实现蛋白完整序列的测定。

百泰派克生物科技使用Thermo公司推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪结合Nano-LC纳升色谱技术，提供多肽测序服务，对多肽序列进行分析。Obitrap Fusion Lumos质谱仪是现在分辨率和灵敏度最高的质谱仪，保证了低丰度肽段碎裂片段鉴定的灵敏度；同时在肽段碎裂过程中采取HCD与ETD结合的模式，保证肽段碎裂片段的完整性。得到质谱原始数据之后，我们使用数据库或de novo从头测序的方式对原始数据进行解析。